文档介绍：第三章动物细胞工程制药参考教材 1.《生物技术制药》《生物技术制药》夏焕章夏焕章高等教育出版社高等教育出版社 2. 2. 《生物技术制药》王凤山《生物技术制药》王凤山人民卫生出版社人民卫生出版社 3. 3. 《生物技术制药概论》姚文兵《生物技术制药概论》姚文兵中国医药科技出版中国医药科技出版社社 2 2017-6-6 第一节概述第二节动物细胞的体外培养第三节动物细胞的培养条件和培养基第四节动物细胞培养的基本方法第五节生产用动物细胞的要求和获得第六节动物细胞大规模培养的方法和操作方式第七节动物细胞生物反应器第八节动物细胞产品的纯化方法和质量要求第九节动物细胞制药的前景与展望本章内容 2017-6-6 3 学习要求: 掌握: 动物细胞培养的基本要求、培养基的种类及主要组成;生产用细胞的要求及获得方法。熟悉: 生产用动物细胞的种类,动物细胞大规模培养的主要方法和操作方式。了解: 动物细胞生物反应器的基本知识,动物细胞制药的发展前景。 4 2017-6-6 第一节概述一、动物细胞培养的历史二、细胞工程学三、动物细胞制药发展历史 2017-6-6 5 动物细胞工程制药两大内容: ?在无菌和人工控制的条件下培养动物细胞以获得多肽和蛋白质药物; ?按照预定的设计,根据细胞生物学及工程学原理,采用遗传操作技术定向改造动物细胞及动物细胞的遗传性状, 利用转基因动物或转基因动物细胞生产疫苗、多肽和蛋白质。已成为生物制药最重要的组成部分之一 2017-6-6 6 基因重组细胞?组织培养或细胞培养:将组织或细胞从机体取出, 在体外模拟机体体内的生理条件进行培养,使之生存和生长。一、动物细胞培养的历史 2017-6-6 7 动物细胞体外培养历史上的里程碑?1885 年德国 Roux 生理盐水培养鸡胚神经板组织,首次提出“ tissue culture ”?1897 年 Loeb 从血液和结缔组织中分离细胞可在血清和血浆中存活?1903 年 Jolly 观察到蝾螈细胞在体外可进行分裂?1907 年 Harrison 无菌条件下培养了离体的蛙胚神经组织,观察到神经细胞突起的生长过程;并在实验中整理出一套合理的无菌操作技术, 被公认为组织培养之父?1923 年 Carrel 发明了卡式瓶培养法,将鸡胚的心肌组织持续培养了 34 年。 2017-6-6 8 ? 20世纪 50年代,各种培养操作技术、培养器皿和培养基孕育而生。 Earle 首创单个细胞克隆培养方法,建立了可无限传代的 C3H 小鼠结缔组织细胞系。? 1951 年, Gay 建立了第一个上皮型细胞系——人宫颈癌 Hela 细胞系。? 1957 年, o 采用胰酶消化处理组织块,用液体培养的方法获得了单层细胞,开创了真正意义上的动物细胞培养技术。? 1962 年, Capstick 成功大规模悬浮培养小鼠肾细胞,标志着动物细胞大规模培养技术的起步。? 1975 年, Kohler 和 Milstein 成功融合小鼠 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分泌特定单克隆抗体的杂交瘤细胞。动物细胞体外培养历史上的里程碑 2017-6-6 9 ?细胞工程:以细胞为单位,按照人们的意志,应用细胞生物学、分子生物学等理论和技术使细胞的某些遗传特性发生改变,从而达到改良或生产新品种的目的, 使细胞增加或重新获得产生某些特定产物的能力,并提取出对人类有用的产品。 P79 二、细胞工程学 2017-6-6 10