文档介绍：光学显微镜的构造（图I-D
普通光学显微镜的构造和使用
1、显微镜构造
显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成（图AD o
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L物镜转换器2接物镜，. U彩虹光与物镜间介质的折射率所得的乘积，可用 下列公式表示：
n=l • i a
式中ric数值孔径；■=介质折射率；a=最大入射角的半数，即镜口角的半数。
因此，光线投射到物镜的角度愈大，显微镜的效能就愈大（图IIIT），该角 度的大小决定于物镜的直径和焦距。同时，a的理论限度为”。，=L 故以空气为介质时（1 = 1）,数值孔径不能超过L如以香柏油为介质时，则・ 增大，其数值孔径也随之增大。如光线入射角为12» ,其半数的正弦为itr =•• 5,则： 以空气为介质时： ricixt. r^e. 5 以水为介质时：
ri£i. 33x». r^i. is
以香柏油为介质时：
ri£i. sax*, r^i. 32
显微镜的分辨力是指显微镜能够辨别两点之间最小距离的能力。它与物镜的 数值孔径成正比，与光波长度成反比。因此，物镜的数值孔径愈大，光波波长越 短，则显微镜的分辨力愈大，被检物体的细微结构也愈能明晰地区别出来。因此, 一个高的分辨力意味着一个小的可分辨距离，这两个因素是成反比关系的，通常 有人把分辨力说成是多少微米或纳米，这实际上是把分辨力和最小分辨距离混淆 起来了。显微镜的分辨力是用可分辨的最小距离来表示的。
X, 能辨别两点之间最小距离=布
式中入=光波波长。
我们肉眼所能感受的光波平均长度为•. SSui,假如数值孔径为•."的 高倍物镜，它能辨别两点之间的距离为•. 42八。而在•. 42UI以下的两点之 间的距离就分辨不出，即使用倍数更大的目镜，使显微镜的总放大率增加，也仍 然分辨不出。只有改用数值孔径更大的物镜，增加其分辨力才行。例如用数值孔 径为L 2S的油镜时，能辨别两点之间的
最小距离=» = M- m。
因此，我们可以看出，假如采用放大率为4•倍的高倍物镜（「、•. /）, 和放大率为24倍的目镜，虽然总放大率为%•倍，但其分辨的最小距离只有».42
假如采用放大率为”倍的油镜（ricL 21）,和放大率为■倍的目镜，虽 然总的放大率为倍，但却能分辨出•. 22UI间的距离。
二、显微镜使用步骤
观察前的准备
（1） 显微镜从显微镜柜或镜箱内拿出时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜 座，平稳地将显微镜搬运到实验桌上。
（2） 将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约Nm左右，右侧可 放记录本或绘图纸。
（3） 调节光照:不带光源的显微镜，可利用灯光或自然光通过反光镜来调 节光照，光线较强的天然光源宜用平面镜；光线较弱的天然光源或人工光源宜用 凹面镜，但不能用直射阳光，直射阳光会影响物像的清晰并刺激眼睛。将»X 物镜转入光孔，将聚光器上的虹彩光圈打开到最大位置，用左眼观察目镜中视野 的亮度，转动反光镜，使视野的光照达到最明亮最均匀为止。自带光源的显微镜， 可通过调节电流旋钮来调节光照强弱。凡检查染色标本时，光线应强；检查未染 色标本时，光线不宜太强。可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器、旋转反光镜调 节光线。
低倍镜观察
镜检任何标本都要养成必须先用低