文档介绍：银杏叶质量标准的对比分析
作者:周云鸿 王军
摘 要 对比分析了《中国药典》2015年版、《美国药典》第41版、《欧洲药典》,其,上药杏灵企业标准与ChP2015保持一致。总体而言,各标准在性状描述上传达的信息没有较大差异。
1)显微鉴别 ChP2015未对银杏叶作规定,,且USP41对粉末鉴定和叶的组织切片鉴别进行了详细介绍,要求更加严格。由于绝大部分银杏叶在中国市场上是以叶子的形式进行流通,并且银杏叶又是其科属种目下唯一品种,不存在难以区分的伪品,故显微鉴别的必要性不大;而在欧美市场上,大量的银杏叶药材是以粉末的形式进行交易[14],故设置显微鉴别项具有一定必要性。
2)薄层色谱鉴别 USP41采用高效薄层色谱法(HPTLC)对银杏叶中黄***类成分和萜类内酯进行鉴别。普通薄层色谱法(TLC)存在展开时间长、效率低、分离度差等问题;高效液相色谱法(HPLC)则存在物质成本、时间成本高等问题;而HPTLC因其制备薄层板所采用的微粒粒度分布较窄,可以大幅提高灵敏度和分辨率[15],同时操作又较为便捷快速,在美国药典中是定性鉴别的常用方法。ChP2015采用银杏叶对照药材进行鉴别,同时通过萜类内酯对照品对其进行鉴别;USP41通过黄***和萜类内酯对照品分别对银杏叶进行鉴别;***进行鉴别。各标准相比,欧美药典因其收载的天然药物较少,对照药材获取渠道更少,故大多采用对照品单体进行鉴别,而且USP41通过HPTLC法对黄***和萜类内酯两类物质同时进行规定,更为严格。根据我国国情,采用对照药材来进行鉴别相比采用对照品而言,成本更低、更加省时,且同样能达到定性鉴别的效果。
2 含量测定项的异同
总黄***醇苷的对比分析
1)色谱条件 上药杏灵与各国药典均采用HPLC法,以甲醇-水-磷酸系统作为流动相,等度或梯度洗脱,检测波长为360 nm或370 nm。条件上没有明显的差异,对检测结果的影响较小。
2)对照品溶液 上药杏灵与ChP2015以甲醇配制槲皮素、山奈素、异鼠李素的混合对照品溶液;USP41要求分别配制3种对照品溶液,时间、物质成本相对较高;。
3)供试品溶液 各国标准均先利用盐酸水解黄***醇苷,再对苷元进行测定。区别在于:上药杏灵与ChP2015均采用索氏提取,三***甲烷除杂后再用甲醇进行提取,制备步骤繁琐,时间较长,且三***甲烷毒性较强;USP41仅采用乙醇-盐酸-水溶液水浴回流提取,较为简便;***提取,提取液浓缩除去***后再加甲醇、盐酸后离心,取上清液水浴,较为复杂。
4)计算方法 上药杏灵及ChP2015均为一次进样,利用校正因子分别计算3种成分含量后相加,简便易行; USP41则对3种成分逐一測定,外标法计算相加,得到总黄***醇苷含量,相对复杂;,以 3种成分的峰面积总和来计算,相对准确性较差。
5)限度要求 上药杏灵对银杏叶中总黄***%;各国药典对总黄***醇苷含量均规定了下限,其中以ChP2015最低。对比发现,企业标准高于各国药典标准。
总体而言,总黄***醇苷项下,各标准在对照品溶液配制、样品处理方法、计算方式等方面均稍有差异,但以上药杏灵所执行的测定计算标准方法最为简便,限度要求最为严格。
萜类内酯的对比分析
1)色谱条件 各标准均采用蒸发光散射检测器进行检测,但流动相稍有差异:上药杏灵与ChP2015采用甲醇-四氢呋喃-水系统等度洗脱,USP41则采用甲醇-水梯度洗脱。
2)对照品溶液 USP41以甲醇-水(1∶1)为稀释液,同时配制4种内酯成分的不同浓度对照品溶液各5份,即一次检测需要配制至少20份对照品溶液,较为繁琐复杂,且物质成本高;其余二者只需配制4种成分的混合对照品溶液,大为省时省力。
3)供试品溶液 USP41采用甲醇水溶液对样品多次涡旋振荡、水浴加热后离心,加入缓冲盐溶液,上硅藻土柱,乙酸乙酯洗脱,步骤繁杂耗时;其余二者通过石油醚除杂,甲醇提取后上硅藻土柱,甲醇洗脱,较为简便。
4)计算方法 各标准均采用蒸发光散射检测器,其中USP41利用对照品峰面积的对数值与成分浓度的对数值存在线性关系的特点,通过最小二乘法建立标准曲线,分别计算4种成分含量后相加;上药杏灵与ChP2015通过外标两点对数方程计算4种成分的含量,极大程度上减小了工作量。
5)限度要求 参与对比的各标准以USP41要求最低,仅规定萜类内酯