文档介绍：硕士研究生开题报告
原发肿瘤和继发转移瘤在生长扩散 都依赖血管生成
新生的毛细血管为肿瘤的生长提供原料
新生的毛细血管（包括毛细淋巴管） 也是肿瘤侵袭转移的必须条件
血管生成在肿瘤中的作用
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血胎盘等
在肿瘤细胞中也有表达
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VEGF—C及受体的主要功能
与VEGFR—3结合促进淋巴管增生
与VEGFR—2结合，促进血管生成
主要作用于淋巴管上
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已有报道，VEGF—C在许多恶性肿瘤组织中有较高的表达，而且其表达强度与淋巴结转移相关。
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VEGFR—3在淋巴系统研究中的作用
淋巴结转移的肿瘤基质中常有淋巴管的增生和扩张，但其分子机制至今未充分阐明
目前对淋巴道转移的研究进展缓慢
Flt-4是淋巴管内皮细胞的特异性标记
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VEGF—C与鼻咽癌的关系
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VEGF—C可以促进一些恶性肿瘤的淋巴道转移
淋巴道也是鼻咽癌最主要的转移途径
局部复发和远处转移是目前治疗失败的主要原因
早期检测和控制淋巴结转移已经成为鼻咽癌防治的一个重要环节
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关于VEGF—C在鼻咽癌中的表达及其在鼻咽癌淋巴结转移中的作用的研究国内还未见报道。
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肿瘤转移与相关基因
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肿瘤转移涉及一系列基因
变化及调控
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c-myc 作为myc原癌基因家族中的一员，定位于人染色体8q24，编码含439个氨基酸的蛋白质
对正常细胞的生长和分化起重要调节作用，其蛋白的过量表达与肿瘤发生有关。
c-myc的结构和功能
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目前，已有报道VEGF和c-myc的表达在胆囊癌形成、发展和转移中有协同作用，提示VEGF 的表达可能受c-myc的调控。
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C-myc是否可以作为一种肿瘤转移 相关基因通过促血管生成来促进鼻咽癌的转移还有待研究
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实验目的
第二部分
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1﹑研究人鼻咽癌组织及裸鼠移植瘤组织中 ，VEGF-A﹑VEGF—C及相关受体的表达﹑分布及癌组织内血管﹑淋巴管的分布，初步探讨其与鼻咽癌的微血管﹑微淋巴管形成﹑淋巴结转移之间的关系及机制;探讨VEGF家族主要成员在鼻咽癌转移中的作用及相互之间的联系。
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2﹑裸鼠体内注射抗VEGF—A﹑ VEGF—C抗体，观察癌组织内血管﹑淋巴管形成及癌细胞的转移情况，为临床应用抗血管生成药物治疗鼻咽癌提供一定的理论依据。
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3﹑探讨c-myc是否可以作为一种肿瘤转移相关基因通过促血管生成来促进鼻咽癌的转移
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第三部分
技术路线
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技术路线
CNE-1 CNE-2Z-H5 CNE-2Z-H5-9
ISH
IHC
Western blot
ELISA
基因及蛋白表达
接 种 裸 鼠
VEGF-A VEGF-C
Flk-1 Flt-4 c-myc
抗VEGF-A
VEGF-C 抗体
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技术路线
鼻 咽 癌
裸鼠移植瘤
常规组织切片﹑染色
ISH IHC
血管﹑淋巴管的显示计数
基因及蛋白表达
VEGF-A VEGF-C
Flk-1 Flt-4 c-myc
抗VEGF-A
VEGF-C 抗体
CNE-1
CNE-2Z-H5
CNE-2Z-H5-9
免疫组化
鼻 咽 炎
硕士研究生开题报告
技术路线
空载质粒
带有VEGF-C基因
的重组质粒
分别转染CNE-1
裸 鼠 接 种
肿瘤的转移情况
CNE-1
CNE-1G
CNE-1GV
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主要实验方法
ISH﹑IHC﹑
- 检测人鼻咽炎及鼻咽癌组织及裸鼠移植瘤组织中VEGF-A﹑VEGF—C及相关受体及c-myc的蛋白表达及mRNA的分布
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主要实验方法
ISH﹑IHC﹑
- 检测鼻咽癌细胞中VEGF-A﹑VEGF—C及相关受体及c-myc的蛋白表达及mRNA的分布
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主要实验方法
ELISA﹑ Western blot
-对人鼻咽癌细胞培养液内中VEGF-A﹑VEGF—C及相关受体及c-myc 表达产物进行定量分析
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主要实验方法
Flk-1﹑ Flt-4作为内皮细胞标记物的免疫组化
-裸鼠移植瘤组织内血管﹑