文档介绍:看了MERKB的帖子,很受启发,想起发这个帖子,希望大家把在过柱子过程中的获得的成功的或不成功的,成熟的或不成熟的经验或想法,留在这块,我们大家可以互相学习,互相交流,期待着共同的进步,共同的提高,希望大家跟帖。谢谢!
先把板子爬好其实也用的填料大,而且粒径越均匀分离效果月越好。如果流动相偏酸或偏碱,建议用聚苯乙烯类填料,这类填料进口的很贵。国内的南京麦科菲高效分离载体有限公司也有同样产品,我用来分离核昔酸,白介-2,EPO效果与Source相当,比活略好,但价格只有Source的70%这是一家留德博士办的公司,采用的是在德研究的技术。还可以根据客户的要求专门制备所需的填料。
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E-mail请问各位大侠:
对于在柱子上不显色的样品如何分离,如何确定各个色带已经分开柱子的粗细,长短对分离有什么影响呢柱子后面跑不动的部分吸附在硅胶上,如何取下来欢迎大家讨论!
回:31楼用TLC板跟踪分析柱子粗的话,分离速度相对会快;长短取决于待分离物的多少(一定长的柱子能否把待分离物分开)和其它因素把硅胶取下来,用溶剂溶解,再过滤除去硅胶,滤液蒸干不知说得对不对,请各位大侠多指教!!!
谢谢32楼!
可是一根柱子至少要过一天,不可能不停的点板把,费时费力费钱阿!
有没有捷径可走呢可以用真空液相层析,分离几十克东西用不了半天,且用硅胶很少。
真空液相层析即vacuumliquidchromatography(VLC),即用真空代替压力进行层析,具体方法可见Synthesis,2001,No,16,2431-,andJchemedu,1997,10,1222-,哈哈,一定要仔细阅读。
但是怎样选择相应的显色剂呢一般还都是适用紫外灯吧这个话题很好,我也老是走不好。请教:一开始是否能用跑板用的比例去洗脱还是极性从小到大怎样去检测各位同仁,有问题要请教了。如果层析硅胶在打开包装后,吸收了空气中的水分,这会不会影响硅胶的分离效果。请各位高手赐教。先谢了。
当然会影响分离效果了因为硅胶的活性级别改变了影响硅胶的吸附性能和爬板是一个道理最近合成了一系列化合物,过柱子时总是分解(不管是硅胶还是中性氧化铝),重结晶又不行请教各位高手应该怎么分离才好回复24楼,我也喜欢用毒性小的溶剂代替毒性大的溶剂,但有时替换以后并不好,你可以先跑板看看再代替,有高效液相走液相也可以。
如果杂点不多的话,完全可以用氯仿,用二氯甲烷代替也许更好,二氯甲烷毒性小得多干法上样,一般用于固体或粘度大的液体样品。样品用低沸点易溶溶剂溶解,加入1-3倍的粗硅胶,晾干或旋干,干燥的标准是硅胶成细粉而不粘在瓶壁上。装好的柱子上留一段溶剂,把吸附了样品的硅胶慢慢到进去,震动柱子或再加一些溶剂,把粘在柱壁上的硅胶洗下。
--作者:leleba--发布时间:2004-3-1621:07:44--请26楼的lanthanum讲讲如何干法上样吧偶不太会,要注意什么吗这个地方真是太好了,我也经常遇到以上的问题,这下可真是收获不小.
有时爬板效果不错,,但走的太慢,!谢了!
在装柱子的时候,不管是湿法还是干法装,用节橡皮管边装边敲打,这样可以把柱子装的