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薄层色谱荧光分光光度法测定黄连中小檗碱含量
摘要建立了薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连中小檗碱的含量。以1%盐酸甲醇为溶剂超声提取，用苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨(6∶3∶∶∶)开放，甲醇洗脱，调整pH值2
薄层色谱荧光分光光度法测定黄连中小檗碱含量
摘要建立了薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连中小檗碱的含量。以1%盐酸甲醇为溶剂超声提取，用苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨(6∶3∶∶∶)开放，甲醇洗脱，调整pH值为12，在Ex＝365nm，Em＝409nm的条件下测定其荧光强度，～，r＝，%。
关键词：薄层色谱-荧光分光光度法；黄连；小檗碱
黄连为毛莨科植物黄连(CoptischinensisFranch)、三角叶黄连()或云连(CoptisteetaWall)的干燥根茎。其主要生物活性成分为小檗碱。本文接受薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连药材中小檗碱的含量。
1仪器与试药
-540型荧光分光光度仪，CS-930双波长薄层扫描仪(日本岛津)。
(中国药品生物制品检定所)；黄连药材(市售)。
2方法与结果
，加入甲醇制成1mg/ml贮备液。用前取贮备液适量用甲醇稀释成20μg/ml的对比品溶液。
〔1，2〕以苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨(6∶3∶∶∶)为开放剂，开放前用氨水饱和15min，展距为13cm，晾干后置紫外灯(365nm)下检视，小檗碱呈现黄绿色荧光斑点(Rf＝)。
3
，加入不同体积的1mol/L氢氧化钠溶液，在Ex＝365nm，Em＝409nm处测定盐酸小檗碱的荧光强度。结果显示20mmol/L氢氧化钠溶液荧光强度最大(见表1)。
表1氢氧化钠浓度对小檗碱荧光强度的影响
氢氧化钠(mmol/L)
(碱液浓度为20mmol/L)，进行荧光强度扫描测定，从扫描图谱得到小檗碱最大激发波长365nm，最大放射波长为409nm(见图1)。
，8，12，16，20μl分别点于同一薄层板上，依法开放、洗脱，将洗脱液依次移入试管内，精密加入甲醇2ml，1mol/L氢氧化钠溶液75μl，摇匀后测定荧光强度。结果表明，～，线性方程为F＝＋，r＝。接受外标两点法计算样品中小檗碱的含量。精密度试验结果表明，同板误差RSD＝%，板间误差RSD＝%(n＝5)。
，精密