文档介绍:蛇毒纤溶酶急性毒性试验研究
【摘要】测定蛇毒纤溶酶的半数致死量〔LD50〕并研究蛇毒纤溶酶的急性毒性。方法小鼠单次静脉注射蛇毒纤溶酶,观察14天内的毒性反响和死亡情况并计算出LD50。结果蛇毒纤溶酶的LD50为24783u/kg,950026628,实验动物消费答应证号:SXK〔粤〕2022-0002,实验动物监测证号:粤监证字2022A004]。
〔批号:070274,北京博康宁生物医药科技〕;%***化钠注射液〔批号:060626-07,昆明市宇斯药业有限责任公司〕;甲醛溶液〔批号:20221101-11,广州化学试剂厂〕。
〔ASP300,德国LEia公司〕;平推式切片机〔irH400,德国Leia公司〕;生物组织包埋机〔LeiaEG1164,德国Leia公司〕;病理图像分析系统〔广州亿鸣公司〕。
[1,2]选用检疫合格的NIH小鼠50只,将动物按体重、性别随机分为5组,每组10只动物〔雌雄各半〕,根据预试结果给药剂量设定为38000、30400、24320、19456、15565u/kg,。给药后连续观察4h,如无异常那么终止持续观察,改为每天观察1次,观察至给药后第14天,观察内容包括:动物外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便、给药部分、动物死亡数量、死亡时间、濒死前反响等。每组动物分别于给药前及给药后1、2、3、7、14天称体重6次。实验过程中因濒死而处死的动物、死亡的动物以及实验完毕时仍存活的动物均进展大体解剖,肉眼观察主要脏器变化,假设有异常均应记录并进展组织病理学检查。饲养室温度与湿度:20~26℃,40%~70%。
±标准差〔x±s〕表示,两组间均数比拟用t检验,按Bliss法计算LD50及95%可信限。
2结果
、呼吸急促的现象,然后趴卧不动,约30in后有6只小鼠死亡,1只小鼠在给药后约1h死亡,3只小鼠在给药后约3h死亡,该剂量组动物死亡前主要反响为阵挛性抽搐、全身震颤、角弓反张、翻正反射消失,其中有2只动物鼻腔出血。30400u/kg剂量组动物给药后即刻亦出现少动、呼吸急促的现象,有4只动物在给药6h内死亡,动物死亡前主要反响为阵挛性抽搐、全身震颤以及腹式呼吸。本组2只动物在给药后第2日死亡。24320、19456、15565u/kg剂量组动物给药后即刻出现少动、呼吸急促的现象,大部分动物约10in后恢复正常,动物死亡发生在药后48h内。从药后第3天到药后第14天,幸存动物活动状况良好,无异常表现。各组动物死亡时间分布情况见表1。用Bliss法计算蛇毒纤维蛋白溶解酶单次静脉注射给药NIH小鼠的LD50为24783u/kg,95%可信限为21519~28823u/kg,见表2。表1NIH小鼠单次静脉注射蛇毒纤维蛋白溶解酶后死亡情况分布表表2NIH小鼠单次静脉注射蛇毒纤维蛋白溶解酶的LD50测定〔Bliss法〕
,其余各剂量组动物均出现体重下降现象。从给药后第2天开场,各剂量组幸存