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从土壤中别离纯化培养微生物并作初步观察鉴定
【摘要】利用别离纯化微生物的根本操作技术对土壤中的微生物进展别离与纯化，根据细菌在选择培养基的存活情况，确定该菌种的固氮解5塞入试管口或瓶口，以防止棉花脱落。有些微生物需要更好的通气，则可用8层纱布制成通气塞。有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞。
7、包扎加塞后，将三角瓶的棉花外包一层牛皮纸或双层报纸，以防止灭菌时冷凝水沾湿棉塞。假设培养基分装于试管中，则应先把装同类培养基的试管扎成捆后，再于棉花塞外一层牛皮纸。然后用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8、。如因特殊情况不能及时灭菌，则应放入冰箱暂存。
9、摆斜面灭菌后，如制斜面，则需趁热将试管口端搁在一根长木条上，并调整斜度，使斜面的长度不超过试管总长的1/2；待其凝固，
10、无菌检查将灭菌的培养基放入37摄氏度温箱中培养24-48h，无菌生长即可使用。或储存于冰箱或清洁的橱，备用。
(二〕选择培养基
配方如下：可溶性淀粉4g，，NaCl , , , 琼脂3~4g, 水200mL, ~。
1、称量和溶解先计算后称量,按用量先称取可溶性淀粉,放入小烧杯中,并用少量冷水将其调成糊状,再加至少于所需水量的沸水中,继续加热,边加热边搅拌,,方法是先在100 ml ,,再在200 ,,其琼脂溶解过程同牛肉膏蛋白胨培养基配制.
2、pH 调节`分装包扎灭菌及无菌检查同上〔一〕
〔三〕配制马丁氏培养基200ml(用1个100ml三角瓶和2支试管分装〕
马丁氏培养基是用于别离真菌的选择培养基。配方如下：， , 蛋白胨1g, 葡萄糖2g, 琼脂3~4g,水200mL，自然pH
1、称量和溶解先计算后称量，按用量称取各成分，并将其溶解在少于所需水量的水中。待各成分溶解后，补充水分至所需体积。再将孟加拉红配成
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1%的水溶液，在200 ，混匀后，再参加琼脂参加融化，方法同〔一〕
2、同〔二〕2
3、链霉素的参加链霉素受热容易分解，所以临用时，将培养基融化待其温度降至45摄氏度左右时才能参加。可先将链霉素配成1%的溶液〔配好的链霉素溶液保存于-20摄氏度〕，在100ml培养基中参加1%,使每毫升培养基中含链霉素30ug。
制备土壤稀释液：
1、取土壤
取表层以下5~10cm处的土壤样品，放入灭菌的袋中备用，或放在4oC冰箱暂存。
2、制备稀释液〔要无菌操作〕
〔1〕制备土壤悬液：，迅速倒入带玻璃珠的无菌水瓶中〔玻璃珠用量以充满瓶底为最好〕，振荡5~10min，使土样