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游离锌离子形态学检测方法探究.doc

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游离锌离子形态学检测方法探究.doc

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文档介绍

文档介绍:游离锌离子形态学检测方法探究
  【摘要】目的:使用ivZnSAG、ZnSeAG、iZnSAG、TSQ荧光、Zinquin荧光对海马苔藓游离锌离子进展染色和比拟。方法:ivZnSAG:采用Na2S溶液灌流的锌离子结合方式;ZnSeAG:,:Allftheabveethdsuldaththezin,.
  1材料与方法
  (Invitrgen);Zinquin荧光染色试剂(日本,Djindabratries);乳化银(Fluka);戊巴比妥钠(Siga);恒冷箱切片机(LEia);双目光学显微镜(lypus)。
  
  (iZnSAG)实验动物2只,均用***化钠肝素溶液〔%***化钠+1l肝素〔500IU/l〕〕灌流30s,直接用250l3%的戊二醛固定液灌流15in。。迅速取脑组织,并将组织放在快速组织切片机上,切出1~2厚的切片,将切片浸入改进Ti溶液中,%硫化钠和3%,。将染缸置于震荡器上,保持4℃。72h后,。用于光镜的:将切片放入30%蔗糖溶液中,直至切片沉到玻璃杯底部。将切片用2冷冻后快速置于冰冻切片机上,降温至-17℃,切10μ切片,然后切片置于AG孵育液[1]内并在恒温(26℃)振动水浴箱内孵育60in,常规脱水透明后,中性树胶封片,在光学显微镜下观察。
  〔ZnSeAG)实验动物2只,%硒酸钠30g/kg,待动物奄奄一息濒死时腹腔注射4%戊巴比妥钠麻醉,暴露心脏,%戊二醛灌流,迅速取脑,%戊二醛固定液中后固定4~6h,然后置于30%蔗糖溶液中,直至组织块沉到玻璃杯底部。常规10μ冰冻切片机切片,然后切片置于AG孵育液[1]内并在恒温(26℃)振动水浴箱内孵育60in,常规脱水透明后,中性树胶封片,在光学显微镜下观察。
  (ivZnSAG)实验动物2只,颈椎离断后,%硫化钠溶液10in大约150l,然后灌注生理盐水10in大约150l,%戊二醛10in大约150l。迅速取大脑组织、%戊二醛后固定3h。然后标本置于30%蔗糖液4℃冰箱保存过夜。次日,标本用恒冷切片机制备10μ的冰冻切片,切片置于AG孵育液[1]内并在恒温(26℃)振动水浴箱内孵育60in,常规脱水透明后,中性树胶封片,在光学显微镜下观察。
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