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文档介绍

文档介绍:细胞生物学实验指导
可在荧光显微镜下察看其次生荧光。
.注意事项:
要获得完整的、有活性的叶绿体,须低温下快速提取,涂片后立刻察看。
六.作 业:
描绘你所察看到的实验现象,自发荧光和次生荧光的区别?
2.叶绿体分别的原理是什么?操作过程中应注意什么?
实验二 吖啶橙(acridineorange) 染色
察看口腔上皮荧光
一.目的要求
熟悉荧光显微镜的原理及使用方法。
察看荧光染料染色后联合物发出的荧光。
二.实验原理
吖啶橙荧光染料可与细胞内 DNA和RNA联合。其吸收光谱 405nm,发射的荧光光谱是
530~640nm,因此,吖啶橙和不同的细胞成分联合后,可发射红橙黄绿蓝各色荧光。
三.实验用品
1.器材:荧光显徽镜、载玻片、盖玻片、染色缸、牙签;
2.材料:口腔黏膜上皮细胞临时制片;
3.试剂

:
1)

液。
A液:

NaH2PO4·

加蒸馏水至

100ml;
B液,

Na2HPO4·

加蒸馏水至

100ml;


、B液





用蒸馏水稀释至

100ml。
2)

%吖啶橙原液:



吖啶橙加蒸馏水至

100ml。临用时配制

%吖啶橙染液:
%吖啶橙原液用


3)95%乙醇
四.方法与步骤
1.用牙签刮取口腔上皮细胞涂在洁净载玻片上;
2.95%乙醇溶液固定 5min;
3.%吖啶橙染液染色 5min;
4.用PBS缓冲液迟缓冲刷;
5.加盖玻片镜检。
五.察看结果:
描绘你所察看到的实验现象,并画图,表示荧光的颜色。
实验三 PAS(PeriodicAcidSchiff)反响显示糖原
和其余多糖物质

(一)熟悉PAS法原理及操作步骤;
(二)察看PAS反响的染色结果,并察看多糖在组织细胞中的散布。

多糖(polysaccharide)是由多个单糖分子缩合脱水而生成的化合物。宽泛散布于动、植物
界。一些不溶性的多糖组成植物和动物的骨架, 如植物的纤维素和动物的甲壳素, 一般称为
构造多糖。另一些多糖在生物体内作为能量贮存,如淀粉(植物)和糖元(动物) ,在需要
时能够经过生物体内酶系统的作用分解,释放出单糖。还有很多多糖拥有更复杂多样的生理功能,如粘多糖、血型物质等,它们在生物体内起着重要的作用。
淀粉和糖原均由D-葡萄糖的分支或直链组成,过碘酸是一种强氧化剂,能将葡萄糖中的乙二醇基(CHOH-CHOH)氧化成两个游离的醛基(-GHO),游离醛基与Schiff试剂反响生成紫红色产物。

(一)试剂:
1、过碘酸酒精溶液:取过碘酸( HIO4·2H2O)

35m1

纯酒精中 ,加入5m1
(),再加入15ml蒸馏水。溶液配好