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基因工程根底知识梳理〔一〕
一、DNA重组技术的根本工具
基因工程又叫_______,指按照人们的愿望,进展严格的设计,通过体外DNA重组与_______等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类第 1 页
基因工程根底知识梳理〔一〕
一、DNA重组技术的根本工具
基因工程又叫_______,指按照人们的愿望,进展严格的设计,通过体外DNA重组与_______等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型与生物产品。其操作水平是在_______上进展设计与施工,操作环境是在生物体外。
1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀〞
〔1〕主要来源:_____生物。
〔2〕特点:能够识别DNA特定的_______,切开两个核苷酸之间的_____。
〔3〕DNA末端:限制酶切割DNA产生的DNA末端有两种形式: _____与 _____。
2.DNA连接酶——“分子缝合针〞
〔1〕作用:将双链___“缝合〞起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的_____。
〔2〕种类
①E·coli DNA连接酶:只能缝合DNA的______。
②T4DNA连接酶:即可缝合DNA的黏性末端,又可缝合双链DNA的_____。
3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车〞
〔1〕载体的种类
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①质粒:是一种裸露、构造简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有_____能力的_____。
②_____的衍生物。
③动植物病毒。
〔2〕质粒载体的特点
①能够在细胞内_______。
②具有一个或多个_______,便于供外源DN***段插入其中。
③具有特殊的_______,供重组DNA的鉴定与选择。
〔3〕质粒载体的处理:真正被用作载体的质粒,都必须在天然质粒的根底上进展__________。
二、基因工程的根本操作程序
1.目的基因的获取
〔1〕目的基因:指编码蛋白质的_____。
〔2〕获取目的基因的方法
①从基因文库中获取目的基因
a.基因文库的含义:将含有某种生物不同基因的许多_____,导入_____的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。
b.基因文库与种类
〔ⅰ〕基因组文库:含有一种生物的_____基因
〔ⅱ〕局部基因文库:含有一种生物的_____基因
第 3 页
c.目的基因的获取依据:
〔ⅰ〕基因的_____序列;
〔ⅱ〕基因的功能;
〔ⅲ〕基因在染色体上的位置;
〔ⅳ〕基因的_____产物mRNA;
〔ⅴ〕基因的翻译产物蛋白质。
②利用PCR技术扩增目的基因
a.PCR的含义:是一项在生物体外_____特定DN***段的核酸合成技术。
b.条件:基因的_____。
c.过程:目的基因受热形成_____,与引物结合,在_____的作用下延伸形成DNA。
d.方式:指数扩增=2n〔n为扩增循环的次数〕
③人工合成法:假设基因较小、_____序列,可以人工合成。
2.基因表达载体的构建
〔1〕表达载体的组成:目的基因+_____+终止子+标记基因。
〔2〕表达载体的功能
①使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且_____给下一代。
②使目的基因_____与发挥作用。
〔3〕启