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细胞产物分析技术质谱分析.ppt

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细胞产物分析技术质谱分析.ppt

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文档介绍

文档介绍:关于细胞产物分析技术质谱分析
第一张,共四十二张,创建于2022年,星期日
§ 概述
§ 质谱仪的工作原理
§ 质谱仪种类
§ 色谱-质谱联用
GC-MS联用
LC-MS联用
§ 应用示例
第二张,共张,共四十二张,创建于2022年,星期日
直接进样法(静态法):对纯的化合物来说,一般为气体或挥发性液体,可直接进样到离子源室,而不需要专用设备或器件,这类似于气相色谱中的样品进样。
直接插入探针法:对于挥发性很小的固体样品,需将样品放在不锈钢杆或探针顶端的小杯内,将探针通过样品加入口放进离子源中,然后加热离子源直至固体挥发。
动态平衡法(色谱进样):对一些组分较复杂的混合物时,需将样品分离成一个个单一组分,再进入质谱仪。最典型的就是气相或液相色谱通过接口与质谱连接。
进样系统
第十四张,共四十二张,创建于2022年,星期日
在离子源中样品被电离成离子,不同性质的样品可
能需要不同的电离方式。
电子轰击电离(electron impact, EI)
电子轰击电离使用具有一定能量的电子直接作用于
样品分子,使其电离。用钨或铼制作的灯丝在高真
空中发射出电子。灯丝与电离盒之间的电压称为电
离电压。对有机化合物通常选用70eV的电压。
离子源
第十五张,共四十二张,创建于2022年,星期日
化学电离(Chemical ionization, CI)
化学电离:是将样品气体和反应气体分子混合(其中
%),进入电离室后,首先用电子轰
击方式使反应气体电离,然后反应气体与样品气体
进行离子-分子反应而使样品气体电离,因此样品的
离子是由离子-分子反应产生的。这样产生的离子能
量较小,故碎片较少。
对于不稳定的有机化
合物,可得到较强的
分子离子峰。
第十六张,共四十二张,创建于2022年,星期日
大气压化学电离(atmospheric pressure chemical ionization, APCI)
在大气压下,化学电离反应的速率更大,电离效率应更高。主要困难是将大气压力下产生的离子转移到处于高真空(<10-6Torr)状态的质量分析器中。现在常用的是电晕放电大气压电离。
第十七张,共四十二张,创建于2022年,星期日
快原子轰击(Fast atom bombardment, FAB)
用加速的中性原子(快原子)撞击以甘油(底物)调和后涂在金属表面的有机化合物(“靶面”),导致这些有机化合物电离的方法称之为快原子轰击(FAB)。由于快原子轰击是一种软电离技术,被分析样品不须经过气化而直接电离,所以,快原子轰击质谱法常用于分析极性强、不易气化和热稳定性差的样品。
第十八张,共四十二张,创建于2022年,星期日
电喷雾电离(Electro spray ionization, ESI)
原理:不锈钢毛细管被加以3-5kV的正电压,与相距
约1cm接地的反电极形成强静电场。被分析的样品溶
液从毛细管流出时在电场作用下形成高度荷电的雾状
小液滴;在向质量分析器移动的过程中,液滴因溶剂
的挥发逐渐缩小,其表面上的电荷密度不断增大。当
电荷之间的排斥力足以克服表面张力时,液滴发生裂
分;经过这样反复的溶剂挥发-液滴裂分过程,最后
产生单个多电荷离子。
电喷雾通常要选择合适的溶剂。除了考虑对样品的溶
解能力外,溶剂的极性也需考虑。一般来说,极性溶
剂(如甲醇、乙***、***等)更适合于电喷雾。
第十九张,共四十二张,创建于2022年,星期日
电喷雾(ESI) 离子化过程
电喷雾离子化可分为三个过程:
1、形成带电小液滴
2、溶剂蒸发和小液滴碎裂
3、最终形成气相离子
第二十张,共四十二张,创建于2022年,星期日
质量分析器
质量分析器的作用是将离子源中形成的离子按质荷比的大小不同分开,质量分析器可分为静态分析器和动态分析器两类。
静态分析器采用稳定不变的电磁场(电磁场随时间改变,只是为了记录质谱而不是分离原理所要求的),并且按照空间位置把不同质量(m/e)的离子分开。属于这一类的仪器有单聚焦磁场分析器和双聚焦磁场分析器。动态分析器采用变化的电磁场,按照时间或空间来区分质量不同的离子。属于这一类的仪器有飞行时间质谱仪、四极滤质器等。
第二十一张,共四十二张,创建于2022年,星期日
四极杆质量分析器
由四根精密加工的电极杆以及分别施加于x、y方向两组高压高频射频组成的电场分析器。高压高频信号提供了离子在分析器中运动的辅助能量,只有符合一定数学条件的离子才能够不被无限制的加速,从而安全的通过四极杆分析器。
第二十二张,共四十二张,创建于2022年,星期日
离子阱
离子阱质谱与四极杆质谱同样利用了离子在射频电场的运动特性。用高频交流电把离子限制在离子