文档介绍：不同碘含量消瘿散结中药对碘缺乏机体甲状腺功能和形态影响的比较研究
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作者:摘要:目的:比较同样具有软坚散结消瘿的富碘中药昆布和非富碘中药夏枯草对甲状腺90-130g,由辽宁中医药大学实验动物中心提供。
实验动物饲料 普通饲料:由辽宁中医药大学实验动物中心提供。低碘饲料:根据卫生部地方病中国医科大学流行病学结果以及承德市地方病研究所提供的资料,采用全国重度缺碘地区河北省承德市隆化县大两间房村的玉米、谷子、黄豆,按73%、20%、7%的比例,加入适量的添加剂(,,MnSO450mg,维生素B66mg,,,,,宝力维他20mg,酵母粉1g),由沈阳市于洪区前民实验动物饲料加工厂制成低碘饲料。饲料碘含量:20μg/kg。
2 实验方法
动物模型制各和处理因素 碘缺乏动物造模方法按照Koiaja法制作,选用4周龄Wistar大鼠(90-130g),雌雄各半,均喂低碘饲料,同时喂含1%高***酸钠的双蒸水19天,续喂双蒸水2天,随机分成4组,每组40只。正常对照组:正常饮食,每日灌服等体积双蒸水(1mL)。模型对照组:低碘饮食,每日灌服等体积双蒸水(1mL)。常规剂量昆布组:低碘饮食,每天同一时间同一体积(1mL)/(kg?d)(按人的常规日处方剂量,按与人相同体表面积折算)。3倍剂量昆布组:低碘饮食,每天同一时间同一体积(1mL)/(kg?d)(按人的常规日处方剂量,按与人相同体表面积折 算)。夏枯草组:低碘饮食,每天同一时间同一体积(1mL)/(kg?d)(按人的常规日处方剂量,按与人相同体表面积折算)。分别在给处理因素后的0、7、28天处死动物,每组每次相应处死12只动物。
标本采集 收集尿液:处死前1天,将大鼠放入代谢笼中,留24h空腹尿,吸取3-5mL,放入5mL eppendorf管中,-20℃冰柜中保存。收集血清:处死前,称体重,20%乌拉坦腹腔注射麻醉,腹主动脉采血,3000r/min分离10min, mleppendorf管中,-20℃冰柜中保存。快速准确取材,迅速分离甲状腺后,电子天平称湿重,迅速放入4%的多聚基甲醛中固定,%戊二醛(, M二甲***酸钠缓冲液配制)中固定。
甲状腺功能测定 血清TT3,RIA法,法国CIS bio公司试剂盒;血清TT4,RIA法,法国CIS bio公司试剂盒;血清TSH,RIA法,Amersham,USA;血清rT3,RIA法,中国原子高科有限公司公司试剂盒;甲状腺组织TT3、TT4,RIA法,法国CIS bio公司试剂盒。
甲状腺形态学观察 4%多聚基甲醛固定,石蜡包埋,5μm厚切片,常规HE染色,光学显微镜下观察。快速准确取材,%戊二醛(, M二甲***酸钠缓冲液配制)中,常规制作投射电镜标本,透射电镜下观察。
甲状腺形态学的定量观察 用美国UIC公司的Metamoth图像分析系统/olympus(DP10)/显微镜(BX51)观察各组Wistar大鼠甲状腺滤泡上皮细胞高度,滤泡腔的面积。每组随机选取4只大鼠(雌雄各半),取甲状腺最大截面做HE切片,低倍镜下输2个视野(包含了整个甲状腺截面),存入Metamorph图像分析系统中。每个图像中非增生的滤泡中随机选取15个滤泡上皮细胞,每组共选60个,测量上皮细胞高度。同时从每个图像中随机选取10个非增生滤泡,每组共选40个,测定滤泡腔的面积。所有数据均存Excell表中,。
尿碘测定 采用中华人民共和国卫生部行业标准规定的方法。
统计学处理 尿碘值用尿碘中位数表示,其余数值用x±s表示。两个样本均数比较用t检验,2个以上样本均数比较用方差分析。P<。全部数据均输入Excell工作表中,。
3 实验结果
MUI测定结果 各组MUI值。
饲料与单味中药碘含量 饲料饮片:20μg/kg;昆布饮片:;昆布汤剂:;夏枯草饮片:;夏枯草汤剂:56μg/L。
甲状腺