文档介绍：货号：MS2305 规格：100管/96样
糜蛋白酶（Chymotrypsin ）试剂盒说明书
微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
糜蛋白酶，又称胰凝乳蛋白酶，是胰腺分泌的一种蛋白水解酶，货号：MS2305 规格：100管/96样
糜蛋白酶（Chymotrypsin ）试剂盒说明书
微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
糜蛋白酶，又称胰凝乳蛋白酶，是胰腺分泌的一种蛋白水解酶，能迅速分解变性蛋白质。糜蛋白酶的功能与胰蛋白酶相似，但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化，对脓性和非脓性痰液均有效；也用于创伤或手术后伤口愈合，如白内障摘除。
测定原理：
糜蛋白酶催化ATEE水解，产物在237nm有特征光吸收；通过测定237nm光吸收增加速率，来计算糜蛋白酶活性。
自备仪器和用品：
台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿 /96孔板（UV板）、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体X1瓶，4°C保存。
试剂二：粉剂X1瓶，4C避光保存。临用前加入20mL蒸馏水充分溶解。
粗酶液提取：
组织样品：按照组织质量（g）:试剂一体积（mL）为1： 5〜10的比例（，加入血1试剂一）冰浴匀浆，8000g，4C离心 10min，取上清，即粗酶液。
测定步骤：
分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到237nm，蒸馏水调零。
试剂二置于37C水浴中保温30min。
空白管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20^ L试剂一，200p L试剂二，混匀于237nm测定 4min内吸光值变化，记为AA空白管。（从吸光值稳定增加开始计时）
测定管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20p L粗酶液，200p L试剂二，混匀于237nm测定4min内吸光值变化，记为△▲测定管。（从吸光值稳定增加开始计时）
注意：空白管只需要测定一次。
糜蛋白酶活性计算公式：

（1）按蛋白浓度计算
活性单位定义：25C每毫克蛋白每分钟催化吸光值增加1为一个酶活单位。
糜蛋白酶（U/mg prot） = （△A测定管一△▲空白管）XV反总：（CprXV1）：T
= （△A测定管一AA空白管）：Cpr
（2）按样本质量计算
活性单位定义：25 C每克样品每分钟催化吸光值增加1为一个酶活单位。
糜蛋白酶（U/g） =（^A测定管一AA空白管）XV反总：（WXV1：V2）：T
= （AA测定管一AA空白管）：W
W：样品质量（g）； Cpr:粗酶液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；V1：加入反应体系中粗酶液体