文档介绍：HIV抗体酶联免疫试验结果的影响因素研究
[摘要] 目的 探讨抗人免疫缺陷病毒(HIV)酶联免疫试验结果的影响因素,提高筛选检查准确性,为艾滋病的防控工作提供快速准确的科学依据。方法 抽取2017年间送检至实验室的患者血清样本加速度没有减慢,准确并且快速检测艾滋病十分重要。目前,常用方法初筛方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光或免疫荧光试验、快速检测(RT)及其他检测试验。其中ELISA试剂盒使用最为广泛,它具有准确性高、价格低廉、判断结果又客观标准、结果便于记录和保存等优点[1]。但酶联免疫试验需大量手工操作,因此易受到多种因素影响,导致结果存在偏差。为了进一步提高酶联免疫试验检测准确性,该文对HIV抗体酶联免疫试验结果的常见影响因素进行分析,现报道如下。
1 资料与方法
一般资料
抽取2017年间送检至实验室的患者血清样本300例。
方法
所有患者均于清晨采取3~5 mL静脉血,尽量避免溶血,非抗凝血自然凝固1~2 h后,以3 000 r/min离心15 min,分离血清,制备标准,监测24 h。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照。经过1 h的孵育,然后洗板,加底物,30 min避光反应后加终止液即完成反应部分。使用北京万泰试剂以及深圳爱康全自动酶免仪,在实施检测过程中,根据试剂使用说明书以及仪器操作指导进行操作,提高质量管控力度。当检测结果显示阴性,则出具详细阴性报告;当显示阳性,则应将检测结果送至市疾控中心艾滋病确认实验室进行确认,整个过程做好保密工作。之后读数,由数值来判断结果的阴性或阳性。 2 结果
全自动酶免仪设为2个阴性对照孔,,,,当实验检测吸光度不在阴阳限定范围内时,即可对相关原因进行判定,重新检测予以确认。在检测的样本中,上报20例,确认阳性15例,4例确认为试验阴性,1例为HIV抗体不确定。
3 讨论
酶联免疫试验特异性强,灵敏度高,重复性好,但检测结果易受多种因素影响,优质试剂、标准化仪器、规范操作方法、高素质技术人员均是保障试验顺利进行的不可缺少的条件。其中任何一项均可能导致检测结果假阴性或者假阳性的出现,影响后续工作。因此,临床应加强管控HIV抗体初筛查质量,确保结果准确性。经大量临床实践分析[2],现将影响因素归结为下几方面。
试剂因素
试剂的选择 检测结果质量是建立在优质HIV抗体试剂基础上的。选择优质试剂考虑因素众多,例如灵敏度、特异性、紧密度、安全性、简单性等,做出全面客观评估,结合实验室具体情况选择灵敏度高、特异性强试剂。实验室应通过厂家详细了解试剂包被物组成成分,包括原料来源、片段组成、片段长短等多项内容[3],进而判断抗原、抗体包被完整性与特异性,查看试剂批号具体了解试剂质量水平与优劣,客观、合理选择实验室试剂。注意订购长效批号试剂,以免发生批号改变时重建质量管控体系。
试剂的准备 在临床实验中常常忽略了试剂的准备程序,将试剂从冰箱中拿出来便立即使用,而该做法可能影响后续工作步骤时间,这可能导致弱阳性标本出现假阴