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文档介绍

文档介绍:专升本复****资料(个人总结)
已尽力保证资料的准确性,但仍难免错漏之处,更不能保证难度与专升本考试要求的相符!
专题一等电点
一、 定义
分子(氨基酸、蛋白质等等)呈电中性(所带正电荷与负电荷相等)时溶液的pH值, 用pI表示。
在专升本复****资料(个人总结)
已尽力保证资料的准确性,但仍难免错漏之处,更不能保证难度与专升本考试要求的相符!
专题一等电点
一、 定义
分子(氨基酸、蛋白质等等)呈电中性(所带正电荷与负电荷相等)时溶液的pH值, 用pI表示。
在不含任何盐的纯水中测得的蛋白质等电点也称等离子点,是蛋白质的特征常数。
二、性质
1、 分子在等电点时以***离子(兼性离子)的形式存在,在电场中既不向正极移动也 不向负极移动。
2、 pH>pI时,分子带负电荷;pH<pI时,分子带正电荷。
【记忆方法:pH小说明H+多,所以分子带正电(+); pH大说明OH-多,所以分子带 负电(.)。】
以氨基酸为例:
NH?
IW
nh2
1 +OH-
HC-COOH ~~、
H-c-cocr
+OH- 1
HCCOO
+H+ 1
R
R
R
阳离子 pH<pI
***离子 pH=pI
阴离子 pH>pT
3、 所谓“酸性氨基酸”与“碱性氨基酸”即是指pH=7时氨基酸的解离情况。天冬氨酸 (Asp)和谷氨酸(Glu)的等电点远小于7,在pH=7时以-COO-和H+的形式存在,与弱酸
类似,故称为酸性氨基酸;此时氨基酸分子带负电。组氨酸(His)、赖氨酸(Lys)和精氨 酸(Arg)在pH=7时带正电。
4、 在等电点时,氨基酸和蛋白质的溶解度最小;此外,蛋白质的黏度、渗透压、膨胀 性和导电能力均为最小。
三、计算
某一基团有一半解离(得或失电子)时溶液的pH称为该基团的pK。氨基酸中由于有 氨基、羧基,所以至少有2个pK值(一半氨基由-NH2变为-NH3+时的pH值和一半羧基由 -COOH变为-COO-时的pH值)。若该氨基酸侧链的基团也可以解离,还会有第3个pK值。
计算氨基酸的等电点时,若其侧链在溶液中不会解离,则其pI值就是两个pK值的平 均值。例如甘氨酸(Gly):
若其侧链在溶液中会解离,则其pI值是该分子等电形式(净电荷为零的形式)两侧的
两个pK值的平均值,另一个pK值忽略不计。例如天冬氨酸(Asp):
COOH
阳离子
***离子
COOH
COO-
阳高子
+
2
侧链解离的氨基酸不多,可以直接记下结果:
COOH
COOH
L88+
组氨酸(His)、赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)(即上文所述三个碱性氨基酸)pI等于 两个大的pK值的平均值,最终结果大于7;
天冬氨酸(Asp)和谷氨酸(Glu)(即上文所述两个酸性氨基酸),还有酪氨酸(Tyr) 和半胱氨酸(Cys)的pl等于两个小的pK值的平均值,最终结果小于7。
四、测定
常见氨基酸的等电点都已被测定,但蛋白质由于基团太多、结构复杂,一般其等电点需 由实验测定。
1、 简易测定法
配制一系列不同pH的缓冲液,向一定体积的缓冲液中加入一定体积和浓度的蛋白质溶 液,混匀,静置一段时间,观察溶液的浑浊程度。由于蛋白质在等电点时溶解度最小,出现 沉