文档介绍：呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）
说明书 【产品名称】
通用名称：呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）
英文名称：PNEUMOSLIDE IgM
商品名称：PNEUMOSLIDE IgM 【包装规格】
组分，不要混用不同试剂盒或不同厂家的试剂组分。只有PBS、 吸附剂、封闭介质和载玻片可与其他批次VIRCELLIFA试剂盒通用，其它组分同批次 可以混用。
每步操作必须使用干净吸头，仅使用干净的耗材，最好是一次性使用的耗材。
包装如有损坏请勿使用。
切勿用嘴吸移液管加样。
本试剂盒中的吸附剂、结合物和质控血清含有动物源性物质，质控血清还含有人 源性物质。尽管本试剂盒中的人血清质控品已经测试为HBsAg、HCV抗体和HIV抗体 阴性，质控血清和病人样本仍应作为潜在感染性物质进行处理。孔内包被的经灭活的
*实验前准备
只有PBS需要预先配制。将试剂2 中的成分加入1L蒸馏水中，摇匀直止完全溶 解。配好后储存在2-8° Co
嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合 胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒 1、2 和 3 型，也仍应视为具有 潜在感染性并小心处置。目前没有方法可以确保这些或其他感染性物质不存在，因此 所有的材料应视为具有潜在感染性进行处置，应遵守当地关于临床废弃物处理的法 规。
结合物、吸附剂、封闭介质和质控品含有叠氮钠（%），避免接触酸和 重金属。
封闭介质含有甘油，请勿接触酸和暴露在高温下。
伊文斯蓝（浓度v %） 是一种致癌物。请勿接触皮肤和眼睛。万一接触到该溶 液，用水彻底冲洗并到医院检查。
仅按本说明书进行操作，不遵守规定的温育时间和温度会导致错误的结果。
载玻片上病人样本交叉污染会导致错误结果，要小心操作防止发生。
显微镜光学系统、光源条件和类型会影响荧光质量。
不要将试剂不必要地放置在室温下过长的时间。
每个载玻片只能使用一次。不要分割，也不要再使用没有用过的孔。
试剂盒里的玻璃组分破碎时可能伤及身体，小心处理。
吸附剂加入样本后要注意观察是否有明显的沉淀出现。
【样本要求】
需由专业人员无菌静脉穿刺采集血液。使用消毒或无菌技术能保持样本的完整 性。血清样本采集后2~8 ° C冷藏，如7天内不检测，则应冷冻（-20° C）保存。不 要反复冻融以防止免疫球蛋白滴度降低，特别是IgMo不要使用高血脂或污染的血清。 若样本中含有微粒要离心使之澄清。
【检测方法】
*实验步骤
1. 使用前，将所有试剂平衡至室温。载玻片平衡至室温后再打开。
按1:1比例稀释血清标本，即25|i L血清加入25|i L PBS2中。质控血清 3 4不 需要稀释。
用抗人IgG吸附剂7 处理稀释后的血清：将30|i L稀释后的血清加入150|i L吸 附剂中，彻底混匀。质控血清3 和 4 不需吸附剂处理。处理后的血清要离心除去沉 淀，以防干扰检测。
在载玻片 1 的每孔中加15|i L吸附剂处理过的血清。在一个载玻片的每孔中加入 15|! L不稀释的阳性质控 3，在另一个载玻片的每孔中加入15|! L不稀释的阴性质控
4.
将载玻片放入湿盒中，37C温育90分钟。
用PBS 2 的缓慢水流简单冲洗载玻片1 （避免PBS直接冲入孔内）后，浸泡在PBS 中并放置在振荡器上轻轻摇动10分钟。将载玻片在蒸馏水中简单蘸洗。
载玻片1自然风干。
每孔加入15|i L抗人IgM FITC结合物溶液画（不需稀释）。
将载玻片放入湿盒，37C温育30分钟。
重复6和7的洗涤步骤。
每孔加1小滴封闭介质 目，小心盖上盖玻片。
尽快用荧光显微镜在400倍放大率下观察结果。如果不能立即观察，可将其避光
放置于2-8° C不超过24小时。
【内部质量控制】
每一批产品在放行前都要经过更加严格的内部质量控制（.）的检验。质控材
料可溯源到经过内部确认的参考血清盘。
【有效性判断】
每一次试验都应设立阳性和阴性质控，以确认试验和试剂盒的有效性。
观察到的荧光模式应为：
阳性质控：腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒或副流感病毒对阳性质控的1-15% 细胞出现苹果绿细胞核和胞浆或胞膜荧光（在副流感病毒和呼吸道合胞病毒中能同时 观察到着色的合胞）；军团菌、衣原体或立克次体中所有的细菌呈现出苹果绿荧光； 支原体对阳性质控在细胞外围呈现苹果绿色荧光。
阴性质控：军团菌、肺炎衣原体和立克次体没有荧光，支原体、腺病毒、甲型和 乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒和副流感病毒的细胞呈现红色。
【检测结果的解释】 阳性结果：可以观察到腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒或副流感病毒对阳性 血清的1-15%细