文档介绍：微生物学实验知识点总结与实践应用
微生物学实验知识点总结与实践应用
微生物实验知识总结与实践应用
经过这学期学****和实验操作，我对《微生物实验》有了一些初步的认识，也从中学****到了有用的知识。 《微生物学实验》是要求我们掌握实的精神。 在实验的绝大部分过程中， 都需要无菌操作， 即对与实验有关的实验人的手， 实验工具器具仪器， 溶液等都需要进行严格的消毒灭菌。 如果因为不慎， 便会造成其它细菌的感染， 直接导致试验的失败。
微生物的实验除了让我们进一步深刻的了解微生物这一广泛分布在天地间
的“清洁工”， 初步了解微生物在环境工程领域的应用。 还培养了我们严谨认真的科学精神， 只有拥有这些精神的人， 才能在试验中获得正确的结果， 才能学会在试验中不断探索，不断进取。
微生物实****总结
华南农业大学
20xx 《微生物学》教学实****总结
专业：课程名称：实****时间：学号 : 植物保护（微生物工程方向）指导老师：
纪春艳，阮小蕾，卓侃微生物教学实****第十周）20xx3020xx19
学生姓名王艳丽班级： 09 植保微生物 2 班一、实****实验内容
（一）土壤微生物的分离、培养及识别
实验目的和内容
目的： 1）掌握从土壤中分离微生物的方法
2 ）掌握常用的分离纯化微生物的操作技术内容： 1）用稀释法分离细菌、放
线菌和霉菌 2）用平板划线方法分离微生物 3）斜面接种及穿刺接种
实验原理①从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微
生物的分离与纯化，方法有：单细胞挑取法、平板划线法和稀释倒平板法。本实
验利用稀释倒平板从土壤中分离细菌、 放线菌和霉菌。 基本原理为： 将含有各种微生物的土壤悬浮液进行稀释后涂布接种到各种选择培养基平板上， 在不同条件下培养，从而使各种微生物在各自的培养基上形成单菌落。 单菌落是一个细胞繁
殖而成的集合体，即是一个纯培养。
②平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后， 其中的微生物充分分散为
单个细胞，取一定量的稀释样液接种到不同选择性培养基的平板上，经过培养，
由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，进行平板菌落计数。
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实验材料
培养基已灭菌的牛肉膏、高氏一号、查氏培养基。 2) 仪器及用具 99mL无菌水 1 瓶，含 9mL无菌水的试管 6 支，80%乳酸， 95%乙醇，无菌培养皿， 1mL无
菌移液管，土壤样品、天平、称量纸、钥匙、试管架、涂布器。4. 操作步骤
（一）土壤稀释分离法分离纯化细菌、放线菌和霉菌 1. 土壤样品采集
待测地块上， 若地块面积小于 50 平方米，对角线三点采样， 若大于 50 平方
米，对角线五点采样。一般定点于耕作层 0--20cm ，先除去表土 1--2cm ，以无菌
铲采土足量充分混匀后用无菌塑料袋分装。
无菌操作制备土壤稀释液
制备土壤悬液：称取土样 1g，迅速倒入含有 99mL无菌水的三角瓶中，振荡 5~10min，使土样充分打散，即成 10-2 的土壤悬液。
稀释：用无菌移液管吸 10-2 的土壤悬液 1mL，吹入 9mL无菌水即成 10-3
稀释液，如此重复，可依次制成 10-3~10-8 的稀释液。注意：操作时管尖不能接触液面，每一个稀释度换用一支移液管， 每次吸入土液后，要将移液管插入液面，吹吸 3 次，每次吸上的液面要高于前一次， 以减少稀释中的误差。 3. 涂布法测定菌落数的方法
涂布法：将 ~ 菌悬液滴在平板表面中央位置， 右手拿无菌涂布器平放于平板表面， 将菌液先沿一条直线轻轻来回推动， 使之均匀分布， 然后改变方向沿另一垂直线来回推动，平板边缘可改变方向用涂布器再涂布几次。
接种量和培养基：细菌：取 10-6 、10-7 、10-8 两管稀释液各 ，分别接入两个牛肉膏蛋白胨琼脂平板中， 涂布均匀。 放线菌：取 10-2 、10-3 、10-4
两管稀释液，在每管中加入 10%酚液 5~6 滴，摇匀，静置片刻，然后分别从两管
中吸出 加入高氏 1 号培养基平板中，涂布均匀。霉菌：取
10-2 、 10-3 、
10-4 两管稀释液各 ，分别接入查氏培养基中，涂布摇匀。
培养将接种好的细菌、放线菌、霉菌平板倒置，即皿盖朝下放置，于
28~30℃中恒温培养，细菌培养 1~2d，放线菌培养 5~7d，霉菌培养 3~5d。观察
生长的菌落，用于进一步纯化分离