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小细胞肺癌标记物.docx

上传人:zhuwo11 2022/7/19 文件大小:23 KB

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小细胞肺癌标记物.docx

文档介绍

文档介绍:小细胞肺癌标记物——proGRP酶免测定试剂盒使用说明 前言
促胃泌素释放肽(gastrin releasing peptide ; GRP )是 1978 年由 McDonald 等从猪 的胃组织中分离出来的,具有促胃泌素分泌促进作用。Oul反应缓冲液。
(3 )请按下图所示,向空白孔以外的各孔加入各50ul ProGRP标准品稀 释液,ProGRP标准液(在3倍系列稀释时,配制5个稀释度较好)或样品,全部加完 后,将酶标板轻轻震荡,使内容物混合。
※下图是加ProGRP标准液之范例,标准品浓度分别为0#,, , 111,333,1000pg/ml.(#:0pg/ml标准液使用 ProGRP标准品稀释液)
(4 )用微孔板密封胶片将酶标板密封,置37弋,反应60分钟。
( 5)反应完毕,将空内容物弃掉,在包括空白孔在内的各孔内加入洗涤液, 330ut ,然后再将洗涤液弃掉,如此重复操作5次。
(6 )洗毕,向除空白孔以外的各孔内加入100ut POD标记抗体液。
(7 )用微孔板密封胶片将酶标板密封,置20~30弋,反应30分钟。
( 8)重复步骤( 5)的洗涤过程。
(9 )洗毕,向包括空白孔在内的各孔内加入100ut OPD底物液。
(10 )用微孔板密封胶片将酶标板密封,置20~30弋,避光反应30分钟。
(11 )反应完毕,向包括空白孔在内的各孔内加入100ut反应终止液,轻轻震 荡酶标板,使内容物混合均匀。
(12 )反应终止1小时内,用酶标仪在490-495nm/600-700nm波长处,测定各 孔吸光度值。
上述步骤是手工操作的,本试剂盒也可用全自动酶免分析仪来进行测定。
结果计算方法
求出ProGRP标准液的吸光度平均值。
(2 )以对数座标图的横轴为ProGRP标准品的浓度,以纵轴为ProGRP标准液的吸光 度值,作出标准曲线(盒内附有座标图纸及标准曲线样图)。
(3 )将测得的样品吸光度值在上述标准曲线上求出样品中ProGRP的浓度(也可用最 小自乘法算出),对于超出标准曲线的样品,可将样品用ProGRP标准品稀释液稀释 后测定。
性能及干扰因素
( 1) 灵敏度
ProGRP标准品稀释液(0pg/ml)。
ProGRP标准液(1000pg/ml)的吸光度值与ProGRP标准品稀释液
(0pg/ml)~.
( 2) 特异性
测定已知浓度的管理用血清时,其测定值是已知浓度的±15%以内。
( 3) 重复性
将同一样品同时进行 5 次测定时,其测定值的变异系数( CV 值)为 15%以下
( 4) 测定范围
0~1000pg/ml。
( 5) 有关样品性质,采集方法以及干扰因素等的注意事项
本试剂盒所用样品为血清
不要进行针对样品中补体的加热处理,因可能会使样品中的ProGRP分解。
有关样品的保存,请在采血后迅速进行血清分离,采血当日进行测定时, 请在4C保存,若于第二天以后进行测定时,请在-20弋一下冷冻保存。
要避免样品的反复冻融
样品中含有沉淀物(纤维蛋白,脂肪等)时,请采用离心分离等操作进行 去除,呈透明后再使用。
胆红素(嵌合型),溶血血红蛋白470mg/dl,乳糜24