文档介绍:实验一 毛细血管采血 白细胞计数
临床检验基础实验
王 梅
江苏大学基础医学与医学技术学院
临床检验与输血教研室
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第一部分 毛细血管采血
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毛细血管采血即皮肤采血法,主要用于需血量微小的检查项实验一 毛细血管采血 白细胞计数
临床检验基础实验
王 梅
江苏大学基础医学与医学技术学院
临床检验与输血教研室
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第一部分 毛细血管采血
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毛细血管采血即皮肤采血法,主要用于需血量微小的检查项
目。所获得的末稍血不单纯是毛细血管血,实际是是微动脉、微
静脉和毛细血管的混合血,并依采血时挤压的力度不同含有少量
细胞间质和细胞内液。
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毛细血管采血器具
采血笔
采血笔结构示意图
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采血笔的使用
拧下采血笔前端笔帽
安装采血针
采血
采血针
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1、准备材料
2、选择采血部位
3、按摩皮肤
4、消毒皮肤
用75%乙醇脱脂棉球擦拭采血部位的皮肤,待干。
5、针刺皮肤
用左手拇指和示指固定绷紧皮肤,右手持采血针自指尖腹内侧迅速刺入
6、拭去第一滴血
7、吸血
血液自然流出时,用微量吸管吸血至刻度
8、止血
毛细血管采血操作步骤
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1、采血前准备
患者、器材
2、选择采血部位
皮肤完整处采血
3、消毒皮肤
无菌操作、一人一针一管、皮肤消毒应待乙醇或碘酊挥发后采血
4、针刺皮肤
迅速,伤口深度
5、拭去第1滴血
6、吸血与检测
微量吸管校准、血液充入管内的速度、应及时测定
毛细血管采血注意事项
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第二部分 白细胞计数
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原理:血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细胞,在血
细胞计数池内计数规定区域内的白细胞总数,换
算成每升血液中白细胞数。
试剂:
白细胞稀释液:冰乙酸
10g/L亚甲蓝3滴
加蒸馏水 至100ml
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器材:
微量吸管、带孔吸头、
改良牛鲍血细胞计数板及专用盖片
1ml刻度移液管、小试管、洁净软纱布、
干棉球、光学显微镜
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微量吸管的使用
1、将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上,连接紧密不漏气;
2、拇指和中指夹住吸头中下端,示指盖住吸头小孔,拇、中指轻微挤压排出适量空气;
3、将微量吸管插入抗凝血,拇、中指缓慢松劲(松动快血液会吸入吸头),吸取抗凝血至所需刻度略上方(不能有气泡),吸管呈水平略下垂,松开示指;
4、用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血(保证血量准确),轻触吸管下口吸去多余血量,使管内抗凝血正处所需刻度;
5、将微量吸管插入小试管底部,三指轻微用力慢慢排出血液,用上清液冲洗管内余血2-3次,轻摇试管混匀;
6、拔出微量吸管弃入污物桶。
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改良牛鲍血细胞计数板结构
计数板上下各一个计数池
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血细胞计数池的方格
计数区域分为9个大方格
四角的大方格各划分为16个中方格
中央大方格划分为25个中方格
四角的大方格为白细胞计数区
中央大方格四角和正中5个中方格为红细胞计数区
白细胞数/L= N/4 ×10 ×106 ×稀释倍数
每个大方格的容积= 面积×高度=1mm2 ×= (μl)
每个大方格的面积= 1mm×1mm=1mm2
(N:4个大方格细胞总数)
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细胞计数原则
大方格四边压线细胞数左不数右,数上不数下,
弓形移动
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(1)加稀释液 。
(2)采血、稀释 用微量吸管采血20ul,拭去管外余血,释放于小试 管底部,用上部稀释液洗净吸管内余血,轻摇试管混匀,静置等其溶血。
(3)清洁计数板及盖片(动作轻柔),夹持盖片缘纵向前推轻放于两侧支持堤上。
(4)充计数池 将小试管轻微振荡2min,立即以一次性微量吸管吸取混匀后的白细胞悬液,充入计数池内。静置2-3min,使细胞沉于计数池底面。
(5)调试显微镜 将计数板放置载物台上,转至低倍镜(10×),调节聚光器使光线较暗,调节旋钮找到方格线,调节光亮。
(6)计数 低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数,压线细胞数上不数下,数左不数右。
白细胞计数操作步骤
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(1)稀释液密封保存,防止污染,小试管、计数板、盖片均须清洁,以免杂质、微粒等被误认为细胞。
(2)采血时针刺深度必须适当,不能过度挤压,防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。
(3)稀释液和采血量要准确,充分混匀,充液适量,无不足、外溢