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氧化葡萄糖酸杆菌.ppt

上传人:孔乙己 2022/7/21 文件大小:730 KB

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文档介绍

文档介绍:氧化葡萄糖酸杆菌
代谢工程技术在微生物产DHA 中的应用
国内外学者将代谢工程技术应用于微生物生产DHA 的研究工作主要包括两个关键方面:
(1)过量表达甘油脱氢酶基因,改善微生物细胞已有的代谢网络。分别利用强氧化葡萄糖酸杆菌
代谢工程技术在微生物产DHA 中的应用
国内外学者将代谢工程技术应用于微生物生产DHA 的研究工作主要包括两个关键方面:
(1)过量表达甘油脱氢酶基因,改善微生物细胞已有的代谢网络。分别利用强启动子tufB 和gdh 使G. oxydans 膜系脱氢酶sldAB 基因过量表达,不但提高了菌体生长的密度,还明显提高了DHA 浓度和转化率。
(2)将甘油脱氢酶基因在模式宿主菌中表达,构建新的代谢途径或拓宽菌株的底物利用范围。
针对目标产物的不同,我们可以对菌株进行改造,以达到我们想要的结果。
如:获得高产量的二羟***,就可以设计乙醇脱氢酶缺陷突变株,使得甘油脱氢酶超表达。重建载体的主要过程:(1)设计寡核苷酸引物(2)获得GDH基因(3)PCR GDH基因(4)酶切PCR合成片段(5)由T4DNA连接酶连接酶切片段到pBBR1 MCS-5载体上获得重组载体(6) DH5α中(7)转化子在含有10μg/mL的庆大霉素LB琼脂平板培养基上筛选。
THANKS
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