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文档介绍:(完整版)微生物的接种技术
(完整版)微生物的接种技术
(完整版)微生物的接种技术
微生物的接种技术
目的

成立无菌操作的观点,掌握无菌操作的基本环节
(完整版)微生物的接种技术
(完整版)微生物的接种技术
(完整版)微生物的接种技术
微生物的接种技术
目的

成立无菌操作的观点,掌握无菌操作的基本环节
实验说明
将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。接种是微生
物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。不论微生物的分别、培养、纯化或判定以及相关微
生物的形态察看及生理研究都必须进行接种。接种的重点是要严格的进行无菌操作,如操作不慎引
起污染,则实验结果就不可靠,影响下一步工作的进行。
实验器材
器械和用品
酒精灯,玻璃铅笔,火柴,试管架、接种环、接种针、接种钩、滴管、移液管、三角型接种
棒等接种工具。
菌种和培养基
菌种:大肠杆菌(Escherichiacoli),金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)。
培养基:普通琼脂斜面和平板,营养肉汤,普通琼脂高层(直立柱)。
实验流程
斜面接种法→液体接种法→固体接种法→穿刺接种法。
操作步骤
斜面接种法
斜面接种法主要用于接种纯菌,使其增殖后用以判定或保留菌种。
往常先从平板培养基上挑取分别的单个菌落,或挑取斜面,肉汤中的纯培养物接种到斜面培
养基上。操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行,先点燃酒精灯。
将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食
指、中指及无名指之间,菌种管在前,接种管在后,斜面向上管口对齐,应斜持试管呈
45~0度角,
并能清楚地看到两个试管的斜面,注意不要持成水平,免得管底凝聚水浸润培养基表面。以右手在
火焰旁转动两管棉塞,使其松动,以便接种时易于取出。
右手持接种环柄,将接种环垂直放在火焰上灼烧。镍铬丝部分(环和丝)必须烧红,以达到
灭菌目的,然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍,尤其是接镍铬丝的螺口部分,要彻底灼
烧免得灭菌不彻底。用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞,将试管口在火焰
上经过,以杀灭可能沾污的微生物。棉塞应始终夹在手中如掉落应改换无菌棉塞。
将灼烧灭菌的接种环插入菌种管内,先接触无菌苔生长的培养基上,待冷却后再从斜面上刮
取少许菌苔取出,接种环不能经过分焰,应在火焰旁快速插入接种管。在试管中由下往上做S形划
线。接种完成,接种环应经过分焰抽出管口,并快速塞上棉塞。再从头认真灼烧接种环后,放回原
处,并塞紧棉塞。将接种管贴好标签或用玻璃铅笔划好标记后再放入试管架,即可进行培养。
5.2液体接种法
多用于增菌液进行增菌培养,也可用纯培养菌接种液体培养基进行生化试验,其操作方法与
注意事项与斜面接种法基真相同,仅