文档介绍：液相色谱质谱联用仪
学院:化学与化工学院
班级:2014级硕士四班
姓
学号:201420119659
名:张易楠
液相色谱
质谱联用仪
摘要:迄今为止,人们所认识的化合物已超过1000万种,而且新的化合物仍在快速地增长,体系的分离和检测已成为分析化学的艰巨任务。色谱-
质谱联用技术,结合色谱和质谱的技术是目前分离和鉴定的最重要的分析方法之一。其中液相色谱-质谱仪的应用最为广泛,液相色谱除了能分析一般的化合物还能分析气相色谱不能分析的强极性、热不稳定性、难挥发的化合物。液相色谱-质谱仪有着分离能力强、分析范围广、定性分析结果准确、分析时间快、自动化程度高、检测限低等诸多优势,在药物食品等诸多领域得到了广泛的应用。
关键词:质谱;液相色谱;质谱-液相色谱联用仪
1高效液相色谱仪简介
高效液相色谱仪是由溶液贮器、高压泵、进样系统、色谱分柱、检测
器和数据处理系统几部分组成。高压泵从溶液贮器中抽走流动相,流经整个仪器系统,形成密闭的液体流路。样品通过进样系统注入色谱
分离柱,在柱内进行分离。柱流出液进入检测器,使已被分离的组分逐一被检测器收集,并将响应值转变为电信号后经放大被数据处理系统记录色谱峰,通过数据处理系统对记录的峰值进行存储和计算。液相色谱仪是依靠色谱柱进行分离的。研究证明:物质的色谱过程是指物质分子在相对运动的两相(液相和固相)中分配“平衡”的过程。液相色谱是以具有吸附性质的硅胶颗粒为固定相,各种洗脱液为流动相。当液体样品在载体流动相的推动下,在液-固两相间作相对运动时,由于各组分在两相中的分配系数(K)不同,则使各自的移动速度不同,即产生差速迁移。各组分在两相间经过多次分配,从而达到使混合物分离的目的。
高效液相色谱法和其它分析方法相比具有很高的分辨率,为了达到最佳的分离效果可以选择流动相和固定相;同时它的分析速度很快,
一般只需要几分钟或者即使分钟;它还具有很高的重复性,使用样品还可以回收;它使用的色谱柱还可以重复使用,非常环保;具较高的自动化程度,在进行分析时,分析的精确度也很高。所以高液相色谱法被广泛应用,尤其是对大部分的有机化合物进行分离和分析,在分离和分析高沸点、极性强、大分子、热稳定差的化合物时有很大的优势。由于分离机制不同,高效液相色谱法可分为以下几类。
(1) 吸附色谱。这种方法的固定相是固体吸附剂,流动相是不同极性溶剂,根据各个组分在吸附剂上的吸附能力不同对其进行
分离。
(2) 分配色谱。这种方法的固定相是液体。因为每一个组分在固定相中的溶解能力不同,对试样中的组分进行分离。
(3) 亲和色谱。这种方法主要是对固定相的结合特性进行利用,然后将分子分离。亲和色谱在凝胶过滤色谱柱上连接和有待分离的物质有一定结合能力的分子,同时这种结合是可逆的,在对流动条件进行改变时,也能对其进行分离。
(4) 离子交换色谱。这种色谱的固定相是离子交换剂,将离子交换树脂上可电离的离子和流动相中的具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,因为这些离子和交换剂的亲和能力不同,就会分离开来。(5)体积排阻色谱。这种色谱的固定相是具有化学惰性的多孔性凝胶,固定相对各组分的体积阻滞作用不同,这样各组分就会发生分离。因为流动相的不同又可分为凝胶过滤色谱和凝胶渗透色谱。
1 检测器的分类
表一介绍了常见的检测器分类方法。
一个理想的液相色谱检测器应具备以下特征:灵敏度高;都所有
溶质都有快速响应;响应对流动相流量和温度变化都不敏感;不引起柱外谱带扩展;线性范围宽;适用的范围广。可惜至今没有一种检测器能完全具备这些特征。
常用的检测器有紫外吸收检测器(UVD)、折射率检测器(RID)、电化学检测器(ECD)、荧光检测器(FLD)。在高效液相色谱技术发展中,检
测器至今是一个薄弱环节,它没有相当于气相色谱中使用的热导池检测器和氢火焰离子化检测器那样的既通用又灵敏的检测器。但近几年出现的蒸发激光散射检测器(ELSD)有望成为高效液相色谱全新的通用灵敏的检测器。上面提到的UVD、RID、FLD、ECD四种检测器皆属于非破坏性检测器,样品流出检测器后可进行馏分收集,并可与其他检测器串联使用。对荧光检测器因测定中加入荧光试剂,其对样品会产生玷污,当串联使用时应将它放在最后检测。 2 质谱
质谱法(MS)是将被测物质离子化,按离子的质荷比分离,测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质量是物质的固有特征之一,不同的物质有不同的质量谱——质谱,利用这一性质,可以进行定性分析(包括分子质量和相关结构信息);谱峰强度也与它代表的化合物