文档介绍：实验一 细菌的培养法
一般细菌均可用人工方法进行培养，使其生长繁殖，以便进一步观察和研究它们的
各种生物学特性。为了获得良好的细菌培养物，在分离培养细菌时，除采用适宜的培养 基并考虑到其他的培养条件（如温度、湿度、酸碱度、气体等）之外，、透明度、颜色等性状。
1
四区
图 1-2 四区划线接种法
2.
斜面培养基接种法
（ 1 ）用记号笔在待接种的培养管上写明标记。
（2）点燃酒精灯。
（3）左手拇指、食指、中指及无名指分别握持菌种与待接种的培养基管，使菌种管位 于左侧，斜面部均应向上，勿成水平，以免凝结水浸润培养基表面，甚至沾湿棉塞。
（4）以右手拇指和食指捏持转动两管棉塞，以便在接种时易于拔取。
（5）右手持接种环，在火焰上烧灼灭菌。
（6）以右手手掌及小指，小指及无名指分别拔取并夹持两管棉塞，将两管管口灭菌。
（ 7）将已灭菌且已冷却的接种环伸入菌种管内， 从斜面上轻轻挑取少量菌苔退出菌种
管（注意，一要防止取菌过多；二要防止弄破培养基表面） 。再伸进待接种的培养基管， 如图 3-2 进行斜面培养基接种，从斜面底部轻轻向顶端弯曲划线，不要触破培养基表面。 沾有细菌的接种环进出试管时不应触及到试管内壁和试管口。
（8）接种完毕，灭菌两试管的管口，塞好棉塞，并放至原来的位置上。重新烧灼接种
环，灭菌后放回试管架上。接种好的试管放 37°C温箱培养，18〜24小时后观察生长情
况。
图1-3 斜面培养基接种法
3. 液体培养基接种法
（1） 用记号笔在待接种培养基上写明标记。
（2） 如斜面培养基的接种方法一样，握持菌种管及待接种的肉汤管。
（3 ）接种环灭菌冷却后，伸入菌种管取少量细菌再伸入肉汤管内，在接近液面管壁处
轻轻研磨，蘸取少量肉汤调和，使菌混于肉汤中（见图 3-3 ）。塞好试管棉塞后，摇动液
体，使细菌在液体中均匀分布。
（4 ）接种完毕，将接种环灭菌后放回试管架上。肉汤管放 37°C温箱培养，18〜24小
时后观察生长情况。
图1-4 液体培养基接种法
4. 穿刺接种法
（1）用记号笔在待接种培养基上写明标记。
（2 ）如斜面培养基接种法，握持菌种管及待接种的半固体琼脂培养基。
（3 ）右手持接种针，灭菌冷却后，以针挑取菌苔，如图 3-4垂直刺入半固体琼脂培养
基的中心，刺达近管底部，但不必及于管底，然后循原路退出。
（4 ）接种完毕，接种针重行灭菌后放至试管架上，塞好棉塞， 37°C培养18〜24小时
后取出观察细菌的生长情况。
图1-5 穿刺接种法
实验二细菌的形态与结构
各种细菌在一定环境条件下，有相对恒定的形态与结构。了解细菌的形态与结构是
鉴别细菌的重要方法之一。此外，对分析细菌的致病性和免疫发生的机理等方面，也有
一定的意义。
目的要求 观察细菌的基本形态和一些细菌的特殊结构。
一、细菌的基本形态
细菌在适宜的生长繁殖条件下所显示的形态可分为三大类：球菌、杆菌和螺形菌。不
同的细菌又可表现出不同的排列方式，在细菌的鉴别上有一定的参考价值。
材料
球菌示教片 葡萄球菌、链球菌和肺炎链球菌
杆菌示教片 大肠杆菌和炭疽杆菌
螺形菌示教片 霍乱弧菌
方法
使用显微镜的油镜观察球菌、杆菌和螺形菌的示教片。
注意各菌的形状、大小、排列方式等特点（注意：细菌染成什么颜色不是本实验
要求，染色方法将在以后实验中实际操作） 。
结果记录
实验结果 葡萄球菌 链球菌 肺炎链球菌 大肠杆菌 炭疽杆菌 霍乱弧菌
细菌形状
细菌排列方式
二、细菌的特殊结构
细菌的特殊结构仅为某些细菌所具有，而且特殊结构的形成受到一定条件的限制。虽 然特殊结构不是细菌生存所必须的，但他们的存在将赋予细菌一定的功能，在致病性、 抗原性、以及对细菌的鉴别上都有一定的意义。
材料
破伤风梭菌示教片（示芽胞）
肺炎链球菌示教片（示荚膜）
变形杆菌示教片（示鞭毛）
方法
使用显微镜的油镜，观察细菌的芽胞、荚膜和鞭毛的示教片。
注意芽胞在菌体上的位置和大小；荚膜的大小及其与菌体的关系；注意鞭毛形态、 数量及其位置。将所观察到的细菌特殊结构的形态特点记录于下表中。
结果记录
细菌 破伤风梭菌 肺炎链球菌 变形杆菌
特殊结构
实验三 革兰染色法
活的细菌为无色半透明状，在普通光学显微镜下不易观察清晰。若用染色的方