文档介绍：薄层色谱法实验
1 参考文献
ChP-2020 版通则 0502 薄层色谱法定义：薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比。
2 准备，黏度较小；
＞展开后组分斑点圆且集中；
＞混合溶剂最好用新鲜配制。
物质分子化学结构中，通常由较极性部分和非极性部分两部分。例如下面以苯丙烷为极性小部分，随着极性基团部分的增加，总体的极性就增加，展开剂极性也增加了。
以下分开讨论不同化合物极性情况及其对应的展开剂。
3操作方法

除另有规定外，在洁净干燥的环境中，用专用毛细管或配合相应的半自动自动点样器械点样于薄层板上。
接触点样时注意勿损伤薄层表面。
可用专用半自动或自动点样器械喷雾法点样。
点间距离可视斑点扩散情况以相邻斑点互不干扰为宜。
【圆点状】
—:d<4mm;
高效板：d<2mm
—-i-
I
【条带伏】
— :5mm^w^10mm;
高效板：4mrn^w^8mm r*n
—IK： 28mm;■高效板：^10mm
图 3 -2 -1 点样要求
-圆点狀或窄细的条带状
T^： 10-15mm
展开将点好供试品的薄层板放入展开缸中，浸入展开剂，密闭。溶剂前沿达到规定的展距，取出薄层板，晾干，待检测。
展开前如需要溶剂蒸气预平衡，可在展开缸中加入适量的展开剂，密闭，一般保持 15~30 分钟。溶剂蒸气预平衡后，应迅速放入载有供试品的薄层板，立即密闭，展开。如需使展开缸达到溶剂蒸气饱和的状态，则须在展开缸的内壁贴与
展开缸高、宽同样大小的滤纸，一端浸入展开剂中，密闭一定时间，使溶剂蒸气达到饱和再如法展开。
必要时，可进行二次展开或双向展开，进行第二次展开前，应使薄层板残留的展开剂完全挥干。
【上行長开］
―:S-crn^L^lScm;箱
高兹按：Scni^L^Scrn
图 3 -3 -1 展开要求
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记录
薄层色谱图像一般可采用摄像设备拍摄，以光学照片或电子图像的形式保存。
也可用薄层色谱扫描仪扫描或其他适宜的方式记录相应的色谱图。
4 系统适用性试验按各品种项下要求对实验条件进行系统适用性试验，即用供试品和标准物质对实验条件进行试验和调整，应符合规定的要求。
（Rf）系指从基线至展开斑点中心的距离与从基线至展开剂前沿的距离的比值。
除另有规定外，杂质检查时，〜。
图 4 -4 -1 展开要求
从基线至展开斑点中心的胆离
I匸行展开L1]
高效板：Scm^LI^Scnn
L2
Rf = n
L1：从基线至展开剂前沿的距离；
L2：从基线至展开斑点中心的距离。
检出限系指限量检查或杂质检查时，供试品溶液中被测物质能被检出的最低浓度或量。一般采用已知浓度的供试品溶液或对照标准溶液，与稀释若干倍的自身对照标准溶液在规定的色谱条件下，在同一薄层板上点样、展开、检视，后者显清晰可辨斑点的浓度或量作为检出限。
分离度(或称分离效能)
鉴别时，供试品与标准物质色谱中的斑点均应清晰分离。当薄层色谱扫描法
用于限量检查和含量测定时，要求定量峰与相邻峰之间有较好的分离度，分离度 (R)的计算公式为：
R=2(d2-d1)/(W1+W2)
式中：
d2：为相邻两峰中后一峰与原点的距离；
dl：为相邻两峰中前一峰与原点的距离；
W1及W2：为相邻两峰各自的峰宽。
除另有规定外，分离度应大于。在化学药品杂质检查的方法选择时，可将杂质对照品用供试品自身稀释的对照溶液溶解制成混合对照溶液，也可将杂质对照品用待测组分的对照品溶液溶解制成混合对照标准溶液，还可釆用供试品以适当的降解方法获得的溶液，上述溶液点样展开后的色谱图中，应显示清晰分离的斑点。
相对标准偏差
薄层扫描含量测定时，
同一供试品溶液在同一薄层板上平行点样的待测成分的峰面积测量值的相对标准偏差应＜%；
需