文档介绍:第 1 卷第 1 期 中央民族大学 120 宿舍学报 No. 1
2011 年 5 月 共振基 (NMR)方法
metabonomics,是定量研究有机体对由病理生理刺激或遗传变异引起的、与时间相关的多
参数代谢应答,它主要利用核磁共振技术和模式识别方法对生物体液和组织进行系统测量
和分析,对完整的生物体(而不是单个细胞)中随时间改变的代谢物进行动态跟踪检测、
定量和分类,然后将这些代谢信息与病理生理过程中的生物学事件关联起来,从而确定发
生这些变化的靶器官和作用位点,进而确定相关的生物标志物 [4]。
NMR 方法具有无损伤性,不会破坏样品的结构和性质,可在接近生理条件下进行实验,
可在一定的温度和缓冲液范围内选择实验条件;可以进行实时和动态的检测;可设计多种
编辑手段,实验方法灵活多样。NMR 还有一个重要的特点,就是没有偏向性,对所有化
合物的灵敏度是一样的。NMR 氢谱的谱峰与样品中各化合物的氢原子是一一对应的,所
测样品中的每一个氢原子在图谱中都有其相关的谱峰,图谱中信号的相对强弱反映样品中
各组分的相对含量。因此,NMR 方法很适合研究代谢产物中的复杂成分[4]。实际上,
NMR 氢谱很早就被用于研究生物体液,从一维高分辨 1H 谱图可得到代谢物成分图谱,即
代谢指纹图谱[5]。
III 液质联用(LC-MS)
LC 已经广泛地应用在生物样品的分析,但几乎是目标成分分析而不是结合化学计量学的
整个样品的指纹谱分析。液相色谱技术强大的分离能力和高灵敏度使人们认识到它也可以
用于生物体液指纹谱。但是色谱用于高通量的样品轮廓谱分析时,还有许多技术问题需要
解决。Pham-Tuan 等针对这些问题,建立了应用 HPLC 进行高通量轮廓谱分析的常规方
法。[7]
LC-MS 技术不受此限制,又经济实用,适用于那些热不稳定,不易挥发、不易衍生化和分
子量较大的物质。质谱多通道监测的功能和色谱卓越的分离能力使 LC-MS 技术对检测样
品的浓度和纯度要求与 NMR 技术相比明显降低,甚至对含量极低的物质也能通过优化质
谱的扫描模式给出可视化响应。同时,LC-MS 技术又有较好的选择性和较高的灵敏度,得
到了越来越广泛的应用。[8]
I 病理生理学研究中的应用
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