菌种鉴定标准操作规程.doc

文档介绍：-
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涂片：用接种环挑取液体培养物中菌体在载玻片上涂成薄层，固体培养物则先在载玻片上滴一滴蒸馏水或生理盐水，用接种环挑取少量菌体在载玻片上涂成薄层。
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- . -总结-
枯燥固定：涂片自然枯燥或在酒精灯火焰上方微热烘干，并在火焰上通过2～3次，以固定涂片。
染色：在已固定的标本上滴加结晶紫溶液数滴，使染色液覆盖整个涂片标本，染色1分钟。
水洗：斜置玻片使很细水流的自来水从染色标本的上端流下，勿使水流直接冲刷涂片处，直至洗下的水呈无色为止，自然晾干或吸干。
镜检：先用低倍镜观察，找到适合的位置，再加一滴香柏油于涂片上，使用100倍物镜观察菌体形态。
4 3%氢氧化钾试验

3%KOH溶液〔W/V〕、无菌木质牙签、待检菌的新鲜纯培养物〔18～24小时〕。

%KOH水溶液。
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，阴性和待检菌的新鲜纯培养物〔18～24小时〕于载玻片上的3滴KOH水溶液中。
～60秒后，轻轻地向外拉该菌悬液，如果是革兰阴性细菌，在菌悬液和牙签之间有黏丝出现，如果是革兰阳性细菌则无黏丝出现。

，则认为该试验菌株的氢氧化钾呈阳性，试验菌株为G-。
，则试验菌株被判断为氢氧化钾试验阴性，试验菌株为G+。
，该实验才有效。
5 触酶试验〔过氧化氢酶试验〕
，而细胞的接触酶能催化过氧化氢，将其分解为分子态氧，使其解毒。向含有接触酶的细菌培养物滴加过氧化氢溶液后即产生大量气泡〔阳性〕。
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- . -总结-

3%过氧化氢溶液、无菌木质牙签、干净载玻片、滴管。

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