细菌一般染色方法.ppt

文档介绍：常用的细菌染色方法
革兰染色
抗酸染色
细菌基本形态结构观察
细菌染色意义
由于细菌个体微小,基本上无色透明,故将其用适当染料染色观察,方能显示它的形态、大小、构造及染色特性等,在细菌鉴别上有重要意义。
革兰染色是细菌学中使用最广泛的一种染色方法,籍此染色法,可将所有细菌区分为两大类。
细菌染色方法及原理
常采用美蓝,结晶紫等碱性染料进行染色。多数染料都是中性有机盐。据着色基的不同可分为以下类型:
碱性染料(basic dye)—带正电染料。其阳离子部分为发色基团,可与细胞中带负电的组分结合。
酸性染料(Acid dye)—带负电染料。其阴离子部分为发色基团,可与细胞中带正电的组分结合。
革兰染色原理
细菌的等电点较低,约在pH 2~5之间,故在中性、碱性或弱碱性溶液中,菌体蛋白质电离后带负电荷,易与带正电荷的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合,使细菌被染成紫色或红色。
一、细菌染色标本片的制备
细菌染色检查,首先要进行细菌标本制备。制备细菌标本一般包括涂片、干燥、固定三步。
固定的目的和方法
使细菌的细胞凝固,使菌体与玻片粘得更牢固
可改变菌体对染料的通透性
加热固定可杀死细菌,比较安全
固定的方法将制成的标本匀速通过火焰三次
革兰染色
染色:
初染(结晶紫)
媒染(碘液)
脱色(酒精)
复染(复红)
滤纸吸干
油镜镜检
safranin
Crystal violet
染色步骤
结晶紫初染
卢戈碘液媒染
95%乙醇脱色
复红复染
(2)
(3)
(1)
(4)
1分钟水洗
1分钟水洗
30秒水洗
30秒水洗吸干
Germ is stained violet or red