文档介绍:(1)在分析天平上精确称取 25mg 脯氨酸,倒入小烧杯内,用少量蒸馏水溶解,
然后倒入 250ml 容量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,此标准液中每 ml 含脯氨酸 100μg。 ml 提取液于另一干净的带玻塞试管中,加入 2ml 冰醋酸及 2ml 酸性
茚三***试剂,在沸水浴中加热 30min,溶液即呈红色。
(3)冷却后加入 4ml 甲苯,摇荡 30S,静置片刻,取上层液至 10ml 离心管中,
在 3000rpm 下离心 5min。
(4)用吸管轻轻吸取上层脯氨酸红色甲苯溶液于比色杯中,以甲苯为空白对照,
在分光光度上计 520nm 波长处比色,求得吸光度值为 。
实验结果:
根据系列脯氨酸浓度液吸光度的测定,得标准曲线如下:标准曲线
度
光
吸
y = +
R2 =
吸光度
0
0 2 4 6 8 10 12 14
脯氨酸含量(μg/2ml)
根据标准曲线上查出 2ml 测定液中脯氨酸的含量(Xμg/2ml),根据公式
y=+,。
结果计算:
计算公式如下:
X V
单位鲜质量样品的脯氨酸含量(%)= T 100
6
W VS 10
其中, X 为从标准曲线查处的 2mL 测定液中脯氨酸的含量(ug/2mL);
VT 为提取液体积(mL);
VS 为测定是取用的样品体积(mL);
W 为样品质量(g)。
X= VT=2ml VS=2ml W=
把以上数据代入公式计算,得木瓜叶中所含脯氨酸为 %。