文档介绍：关于紫外可见分光光度法 (3)
第1页，讲稿共84张，创作于星期二
主要内容：
&重点难点：
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紫外可见分光光度分析的基本原理
紫外可见分光光度分析的条件选择
紫外可见分光光度计的基本构造和使用流程
q
q
q进入单色器
准直镜：透镜或凹面反射镜，使入射光成为平行光束
色散元件：棱镜或光栅，将复合光分解成单色光
准直镜：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝
出射狭缝：用于限制通带宽度
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3．吸收池
吸收池也称比色皿，用于盛放参比溶液或待测溶液。它是由无色透明、耐腐蚀、化学性质相同、厚度相等的玻璃制成的， cm，1 cm，2 cm，3 cm和5 cm。在可见光区测量吸光度时使用玻璃吸收池，紫外区则使用石英吸收池。使用比色皿时应注意保持清洁、透明，避免磨损透光面。
使用时注意点
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4．检测器
检测器的作用是接受从比色皿发出的透射光并转换成电信号进行测量。分为光电管和光电倍增管。
光电管是一个真空或充有少量惰性气体的二极管。阴极是金属做成的半圆筒，内侧涂有光敏物质，阳极为一金属丝。光电管依其对光敏感的波长范围不同分为红敏和紫敏两种。红敏光电管是在阴极表面涂银和氧化铯，适用波长范围为625—1 000nm；紫敏光电管是阴极表面涂锑和铯，适用波长范围为200—625nm。
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光电倍增管是由光电管改进而成的，管中有若干个称为倍增极的附加电极。因此，可使光激发的电流得以放大，一个光子约产生106～107个电子。它的灵敏度比光电管高200多倍。适用波长范围为160～700 nm。光电倍增管在现代的分光光度计中被广泛采用。
5．显示装置
显示装置的作用是把放大的信号以吸光度A或透光率T的方式显示或记录下来。分光光度计常用的显示装置是检流计、微安表、数字显示记录仪。
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二、紫外可见分光光度计类型
1. 单光束分光光度计
2. 双光束分光光度计
3. 双波长分光光度计
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721分光光度计
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光源
单色器
吸收池
检测器
显示
单波长单光束分光光度计
简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，
一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有
很高的稳定性，且操作麻烦，任一波长的光均要用参
比调T=100﹪后，再测样品
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仪器
可见分光光度计
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双光束分光光度计
比值
光源
单色器
吸收池
检测器
显示
光束分器
自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵 敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂， 价格较高。
裂
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仪器
紫外-可见分光光度计
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双波长分光光度计
光源
单色器
单色器
切光源
检测器
吸收池
不需要参比溶液；可以消除背景吸收干扰；适合多组分混合物、浑浊试样的定量分析，可进行导数光谱分析。价格昂贵
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三、仪器使用基本流程
紫外可见分光光度计
1、分光光度计的保养与维护
2、操作的注意事项
3、定性分析依据？？？
定量依据？？？
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定性分析基础
定量分析基础
物质对光的选择性吸收
在一定实验条件下, A∝c
A
c
增大
A
B
A
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第二节 紫外可见分光光度法的定性分析
1．分子吸收光谱的产生
当一束光照射到某物质或某溶液时，组成该物质的分子、原子或离子等粒子与吸光子作用，光子的能量发生转移，使这些粒子由低能量轨道跃迁到高能量轨道，即由基态转变为激发态。
M(基态) + h M*(激发态)
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M(基态) + h M*(激发态)
这个过程即是物质对光的吸收。由于分子、原子或离子的能级是量子化的，不连续的，只有光子的能量(h)与被照射物质粒子的基态和激发态能量之差(E)相等时，才能被吸收。