文档介绍：关于荧光显微镜的基本使用方法
第1页，讲稿共22张，创作于星期三
实验目的
1. 了解荧光显微镜的基本原理；
2. 掌握荧光显微镜的基本结构和使用注意事项；
第2页，讲稿共22张，创作于星期三
自发性荧光物质
神经有313, 337, 365, 405, 436, 546, and 577 纳米的峰值谱。高压 Xenon灯有连续的可见光光谱范围, 光源强度比较平均。
***灯光谱
第10页，讲稿共22张，创作于星期三
激发滤色块
具有多套激发滤色块：激发滤色镜（Excitation Filter），分光镜（Dichromatic Mirror），发射滤色镜（Emission Filter）。
激发滤色块
六孔激发块转盘
第11页，讲稿共22张，创作于星期三
多用途型BX-RFA(适合多种科研要求)及通用型BX-URA2。可同时使用6种荧光激发块， “轻拨式”激发块转换功能，使不同荧光激发之间的迅速转换非常方便，并可消除震动，有利于复染样品的荧光观察。激发块标识在暗室环境中发光，在暗室中也能很容易地选择需要的荧光激发块。另外，根据需要还可以选择6孔滤色片滑块(U-RSL6/U-RSL6EM)安放激发滤色片和发射滤色片进行荧光观察。
第12页，讲稿共22张，创作于星期三
第13页，讲稿共22张，创作于星期三
BX51 在镜基上装有3个滤色片（ND6，ND25，LBD），另外，还可以选装第四个。镜基侧面的拉杆可以很容易地插入/取出滤色镜。
Specimen color fading can be delayed by reducing the excitation light intensity with ND filters. Use the ND filters as far as they do not hinder
observations.
Insert the ND filters (U-25ND6 and/or U-25ND25) with the marked side facing toward the observer.
第14页，讲稿共22张，创作于星期三
第15页，讲稿共22张，创作于星期三
1、 该镜可作为明视场显微镜使用，也可作为荧光显微镜使用，根据需要，做相应的附件连接，开启相应的电源。禁止乱调设置，以免影响他人正常使用。
2、 作为明视场显微镜使用；A、接通电源后，打开显微镜底座前的电源开关，按光亮需要调节底座右侧的滑竿。B、根据需要，调节底座光栅和聚光器光栅及其高度，可获得最佳的图象效果。C、需要图片，要把镜体上的相应拉杆拉到绿线位子。按下相应附件上的照相按扭。
3、 作为荧光显微镜使用；A、先关闭荧光通道，再打开荧光激发器电源，等待15分钟。B、等待期间，打开显微镜光源，找到需要观察的样品，选用合适的物镜，调整焦距。C、关闭显微镜光源，打开荧光通道。D、需要图片，要把镜体上的相应拉杆拉到绿线位子。按下相应附件上的照相按扭。
第16页，讲稿共22张，创作于星期三
细胞核与细胞质DNA的直接荧光染色
第17页，讲稿共22张，创作于星期三
线粒体GFP转基因拟南芥
根（显示叶绿体）
叶片
第18页，讲稿共22张，创作于星期三
注意事项
激发光挡片的使用----减少淬灭
第19页，讲稿共22张，创作于星期三
注意事项
荧光的淬灭与激发光的照射时间成正比，因此应尽量减少观察时间外激发光对样品的照射。激发光挡片可以部分或完全阻断激发光光路。在正式观察样品之前，激发光光路应该处于完全阻断状态。否则，在我们将样品放到载物台上，移动样品台将样品调整到物镜位置，找到要观察的细胞并进行调焦的过程中，样品上的荧光可能已经发生了相当程度的淬灭。为了避免观察前不必要的淬灭，上述一系列操作需要在透射光源下进行。
当眼睛离开物镜进行记录或将显微镜交给合作实验者观察时，要随手阻断激发光光路。实践结果表明，熟练、规范和合理的观察操作可以将样品淬灭对观察和记录造成的影响降低到最小限度。
荧光信号的淬灭还与激发光的强度成正比。因此，在可以观察到荧光信号的情况下，应该尽量降低激发光的强度。这样做还有利于降低背景。
第20页，讲稿共22张，创作于星期三
NOTES
The inside of the ultrahigh-pressure mercury burner is very hot and hazardous during lighting and for about 10 minutes after turning off. Do not open the lamp housing in this period.
The mercury bur