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SRDP实验报告范文
一、实验目的
测定酸模、香蒲、毛茛、青岛藨草、绿萝5种湿地植物在污水净化过程中根内酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和脲酶活力。
二、实验方法
(1)根中、实验过程
取30个1L容量的大烧杯，洗净。将生长态势比较一致的5种植物从清水中取出，植物根部用15%的双氧水灭菌处理10分钟后，用蒸馏水清洗干净，按照每组湿地植物湿重相等的原则，放入大烧杯。将烧杯分成5组，分别栽种香蒲、绿萝、青岛藨草、酸模、毛茛，每一组由两小组组成，栽种香蒲的两小组编号为X和X0，栽种绿萝的两小组编号为L和L0，栽种青岛藨草的两小组编号为Q和Q0，栽种酸模的两小组编号为S和S0，栽种毛茛的两小组编号为M和M0，每组中前者中加入250ml自配污水，后者作为对照加入等量的自来水。
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酶液提取：，放入研钵，再向其中加入1ml磷酸缓冲液()，小心研磨至匀浆，再将其全部吸入离心管中，在0℃下00r/min转速的条件下，离心30min，上清液为待测液，。
具体方法：·L-1醋酸钠缓冲液70ml，·L-1对硝基苯磷酸二钠(pNPP)酶反应液，，置于25℃下培养1小时。向其中加入1ml3NNaOH溶液，以终止酶促反应，使用α-1860S紫外可见分光光度计在405nm波长处进行比色测定。在单位时间内单位重量鲜根水解pNPP生成的pNP量来表示酶活性(μg·h-1·g-1鲜根)。
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：测定方法与酸性磷酸酶的类似，唯一的区别是酶反应液是由Tris-HCl缓冲液(pH=)配制的。
：。具体方法同根中酸性磷酸酶。
：。具体方法同根中碱性磷酸酶。
：奈氏试剂显色法。
酶液提取：，放入研钵，再向其中加入1ml磷酸缓冲液(PH7)，小心研磨至匀浆，再将其全部吸入离心管中，在0℃下00r/min转速的条件下，离心30min，上清液为待测液，。
具体方法：取适量的干净试管，并给试管编号，-(pH7)，然后将试管放入37℃恒温水浴锅中，并预热5min。1号管作为空白对照，，，将所有试管混匀后在37℃水浴锅中恒温水浴条件下反应5min。%三氯乙酸使反应终止。取其中的1mL反应液，加入9mL蒸馏水稀释反应液，%酒石酸钾钠反应一会，。在波长420nm时测定各管溶液的吸光度，1号管作对照。最后做出硫酸铵浓度标准曲线，据此方程计算酶活，测得铵浓度与吸光度关系拟合方程为OD42