文档介绍：淀粉酶活性的测定
一、 实验目的
酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究 酶的基础。酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定时间内一定量的 酶催化生成产物的量得到。
淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的淀粉酶活性的测定
一、 实验目的
酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究 酶的基础。酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定时间内一定量的 酶催化生成产物的量得到。
淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。a-淀粉酶是一种典型的内切型 淀粉酶，主要作用于淀粉水解的液化阶段，因此又叫液化酶。作为一种最重要的工 业酶制剂，a-淀粉酶广泛存在于动物，植物和微生物中。其中，微生物a-淀粉酶 以其经济易得成为工业生产主要来源。目前，关于a-淀粉酶活性的测定方法很多 种。
本实验采用杨氏改良法测定a-淀粉酶；掌握测定a-淀粉酶活性大小与温度 关系的方法，通过分析得出酶的最适温度范围。
二、 实验原理
酶促反应中，反应速度达到最大值时的温度和pH值称为某种酶作用时的最 适温度和pH值。温度对酶反应的影响是双重的：一方面随着温度的增加，反应 速度也增加，直至最大反应速度为止；另一方面随着温度的不断升高，而使酶逐 步变性从而使反应速度降低，其变化趋势呈钟形曲线变化。
不同菌株产生的酶在耐热性、酶促反应的最适温度、PH、对淀粉的水解程度， 以及产物的性质等均有差异。a -淀粉酶属水解酶，作为生物催化剂可随机作用 于直链淀粉分子内部的a-1,4糖苷键，迅速地将直链淀粉分子切割为短链的糊精 或寡糖，使淀粉的粘度迅速下降，淀粉与碘的反应逐渐消失，这种作用称为液化 作用，生产上又称a -淀粉酶为液化淀粉酶。a -淀粉酶不能水解淀粉支链的a-1,6 糖苷键，因此最终水解产物是麦芽糖、葡萄糖和a-1,6键的寡糖。
本实验通过淀粉遇碘显蓝色，淀粉含量越高，颜色越深。用分管光度计检测 显色效应大小，通过分管光度值计算酶活力
注意：实验中为了消除非酶促反应引起的淀粉水解带来的误差，每组实验都 做了相应的对照实验，在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以 校正。
在实验中要严格控制温度及时间，以减小误差。并且在酶的作用过程中，三
支测定管及空白管不要混淆。
三、 材料、试剂与仪器
实验材料：a-淀粉酶
仪器：分光光度计、电热恒温水浴锅、小台秤、研钵、玻璃仪器若干
试剂：
NaOH/ CH3COOH 及 HCl：
%工作碘液：，定容至1000mL；
1%糊化淀粉溶液：， NaOH, 60°C5min，冷 却后加 25