脑组织冰冻切片.pdf

文档介绍：1、 冰冻切片的保存
我做的脑组织，直接断头取脑，用 OCT 胶包裹脑组织，放入异戊烷中在-80 度
冰箱中速冻 1 分钟，取出后用锡箔纸包好，冻存于1、 冰冻切片的保存
我做的脑组织，直接断头取脑，用 OCT 胶包裹脑组织，放入异戊烷中在-80 度
冰箱中速冻 1 分钟，取出后用锡箔纸包好，冻存于-80 度冰箱保存。切片前-20
度回温半小时，即可切片。冰冻切片也放-80 度冰箱保存。做组化时用 4%多聚
甲醛放 4 度固定 15 分钟。
如果标本量较多，需要保存一段时间后再冰冻切片，我目前是把标本经 OCT 包
埋后，液氮速冻，待 OCT 完全冻硬变白后，转入-80 度保存。这样处理的标
本，切出来的片子很好看！也没有冰晶。
2、 作了冰冻切片但不能马上染色，切片应如何保存呢？
① 如果想第二天做，可以直接放在 4 度，如果想多放几天，冰冻切片干后以冷丙
酮固定 10 分钟，放入－20 度冰箱保存至染色可行。我曾保存了一个多月都没
问题。染色前，从冰箱取出后 4 度复温 20min，再室温复温 15min 即可。用
PBS 洗后，即可接后续步骤。
② 两点个人经，验 仅供参考：
1、 如果切片为 40 微米或者更厚，放在 PBS 中，液体要足够多，至少没过组
织切片