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上传人:guoxiachuanyue012 2022/7/28 文件大小:19 KB

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第十九章补体检测及应用
补体是一组存在于人和脊椎动物血清、组织液或某些细胞膜上的具有酶样活性、不耐热的糖蛋白。补体不是单一成分,其在功能效应上是以连续反应的程序进行的,故又称补体系统。补体系统广泛参与机体的抗感染防御反应及免疫用于自身免疫病的诊断,也可作为某些疾病活动期的参考指标。
在细菌感染,特别是革兰阴性细菌感染时,常因补体旁路途径的活化而引起血清补体水平的过度降低;而心肌梗死、甲状腺炎、大叶性肺炎、糖尿病、妊娠等情况下,血清补体水平常见升高。
第三节单个补体成分的测定
C3、C4、Clq、B因子和Cl酯酶抑制物等,常被作为单个补体成分的检测指标。常用免疫溶血法检测单个补体成分的活性;基于抗原抗体反应的血清学法(免疫化学法)测定其含量。目前应用自动化免疫散射比浊法可准确测定体液中C3、C4等多个单一的补体成分。
一、免疫溶血法
该方法中抗原为SRBC,抗体为兔或马抗SRBC的抗体(IgG、IgM型),即溶血素。试验中有两组补体参与,一组缺少待测成分的试剂(R试剂)。加入致敏SRBC(检测经典途径补体成分用)或兔红细胞RRBC(检测替代途径补体成分用)后,不发生溶血。另一组为待测血清中的补体,当加入待测血清,补体成分齐全,产生溶血。溶血程度与待测补体成分活性有关,仍以50%溶血为终点。
采用免疫溶血法检测待测标本中某一单个补体成分是否缺乏,可以帮助诊断补体某个成分缺失或其含量正常但无溶血活性的先天性补体缺陷。无需特异仪器与设备,快速,但敏感性较低,影响因素多。该法不是检测某补体成分的具体含量,而是检测其活性,在某些需了解该成分活性情况下,本试验适用。
二、免疫化学法
分为单向免疫扩散、火箭免疫电泳、透射比浊法和散射比浊法。后两种方法可通过仪器对补体的C3、C4、B因子等单个成分进行自动化测定。待测血清标本中的C3、C4成分,经适当稀释后与相应抗体反应形成复合物,反应介质中的PEG可使该复合物沉淀,仪器对复合物产生的光散射或透射信号进行自动检测,并换算成所测成分的浓度单位。
该法是借助补体的抗原性和与相应抗体反应的前带原理建立的补体单个成分定量检测法。利用前带原理必须以过量的抗补体抗体保证准确测定的质量。因其简单、特异、重复性好、自动化程度高而颇受使用者欢迎。
精品
自动免疫比浊法可反映所测补体成分的绝对量,并能进行标准化流程管理与质量控制,是目前国内外临床免疫检测中的主要检测方法。
第四节补体结合试验(CFT)
将免疫溶血作为指示系统,用以检测另一反应系统中抗原或抗体的传统方法。该方法并非用于补体的检测,而是利用补体的溶细胞作用进行各种物理状态的抗原抗体测定。
一、试验原理
包括①反应系统:已知抗原(或抗体)与待测抗体(或抗原);②补体系统;③指示系统:SRBC与相应溶血素预先结合,成为致敏绵羊红细胞。反应分两步进行。首先是反应系统与补体的作用;第二步是指示系统利用剩余补体的反应。如反应系统中有抗体或抗原,则形成免疫复合物而固定和消耗补体,使后加入的SRBC-抗SRBS指示系统无多余补体可利用,则无溶血反应发生,反之亦然。
不溶血为补体结合试验阳性,而溶血为试验阴性。试验中将反应系统的待测抗原(或抗体)作系列倍比稀释可作半定量测定。试验中以50%不溶血作为判断终点。
二、试验方法
(一)试剂的准