文档介绍：基因工程
一、选择题
.下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、 DNA聚合酶、
DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是
A.①②③④ B.①②④③
C .①④②③ D .①④③②
解析①是
G A A J T C C A A T T -c
A. DNA连接酶、限制酶、解旋酶
、解旋酶、DNA连接酶
C .解旋酶、限制酶、DNA连接酶
、DNA连接酶、解旋酶
解析 使碱基对内氢键断裂的是解旋酶；限制酶将特定部位的相邻两脱氧核甘酸之间的磷酸二酯键断开;
连接DN***段间磷酸二酯键的是 DNA连接酶。
答案 C
.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是
( )
.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
解析限制性核酸内切酶用于提取目的基因和切割载体， 烟草花叶病毒的遗传物质是 RNA,不能用限制性
核酸内切酶切割，A项错误；DNA连接酶可以连接具有相同粘性末端的目的基因和载体， B项正确；受体
细胞可以是受精卵和体细胞，也可以是去除细胞壁的原生质体， C项正确；目的基因为抗除草剂基因，所
以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力，筛选时应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞， D项正确。
答案 A
二、非选择题
.回答下列有关基因工程的问题。
(1)基因工程中使用的限制酶，其特点是 。
如图四种质粒含有 E1和E2两种限制酶的识别位点， Apr表示抗青霉素的抗性基因， Tcr表示抗四环素的
抗性基因。
(2)将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接，连接后获得的质粒类型有 (多
选)
A. X-1 B, X-2 C, X-3 D. X-4
(3)若将上图所示X-1、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两
种培养基上。在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有
(4)如果X-1用E1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片断：那么质粒(X-2Tcr基因的长度为1200
对碱基)用E2酶切后的片段长度为 对碱基。
(5)若将外源的Tcr基因两端用E2切开，再与用E2切开的X-1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示, 含X-4的细胞数与含 X-1的细胞数之比为1 ：3,增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？ 原
因是
解析(1)基因工程中使用的限制酶，其特点是特异性地识别和切割 DNA o
⑵用限制酶E1切开质粒X-1后，质粒X-1暴露出两个粘性末端， APr被切下。两端用E1切开的Tcr基
因含有与上述切割后的质粒 X-1, Apr含有相同的粘性末端,混合后可形成 X-1、X-2和X-3。
(3)含质粒X-1的细胞可在含青霉素培养基上生长， 含质粒X-2的细胞可在含四环素培养基上生长； 含质粒
X-3的细胞不含抗性基因，不能在两种培养基上生长；不含有质粒的细胞也不能在两种培养基上生长。
(4)X-2的长度为1200 +3550 =4750 ,用E2酶切后质粒由环状变为