文档介绍:ABO、RhD血型鉴定
抗(-A)、抗(-B)、抗(-D)标准血清与红细胞悬液分别混匀放置一段时间后,标准血清与红细胞表面是否含有相应的抗原而产生不同的凝集现象,将ABO血型分为四种(即A、B、O、AB型),Rh(D)血型分为
ABO、RhD血型鉴定
抗(-A)、抗(-B)、抗(-D)标准血清与红细胞悬液分别混匀放置一段时间后,标准血清与红细胞表面是否含有相应的抗原而产生不同的凝集现象,将ABO血型分为四种(即A、B、O、AB型),Rh(D)血型分为阳性、阴性二种。
血型凝集示意图
抗-B
抗-A
抗(-D)
血型:AB型
Rh(D):阳性
抗-B
抗-A
抗(-D)
血型:B型
Rh(D):阴性
抗-B
抗-B
抗-A
抗-A
抗(-D)
抗(-D)
血型:A型
Rh(D):阳性
血型:O型
Rh(D):阳性
反定法(试管法)
取小试管2支,分别标明A、B,并同时加入受检者血清各2滴,在A管加入3%~5%A型红细胞悬液1滴;B管加入3%~5%B红细胞悬液1滴,混匀,1000r/min离心1min或3000r/min,离心15秒,取出观察凝集情况。
Ac
Bc
首先在A、B管中加入受检者血清各2滴
加入Ac1滴
加入Bc1滴
混匀后离心观察结果
离心机
反定型 (试管法)
Ac
Bc
无凝集
凝集
血型:A型
ABO正反定型结果判断
受检者红细胞与标准血清(正定型)
受检者血清(浆)与标准红细胞(反定型)
受检者血型
抗-A
抗-B
Ac
Bc
+
-
-
+
A
-
+
+
-
B
-
-
+
+
O
+
+
-
-
AB
交叉配血试验
盐水配血法
目的:检测献血者与受血者之间血液是否相配,确保输血安全。
适用范围:适用于血清完全抗体(IgM)的检测。
使用仪器和材料:离心机、试管、试管架、生理盐水、显微镜等。
原理:在电解质(生理盐水)溶液中,带正电荷的Na+能降低红细胞表面的负电荷,减少了红细胞的排斥力而发生抗原抗体结合使红细胞凝集,从而发现配血不合。
聚凝***配血法
目的:与盐水法相同
适用范围:适用于血清中不完全抗体(IgG)的检测
仪器与材料:离心机、试管、试管架、聚凝***试剂、吸管等。
原理:聚凝***是一种高价阳离子聚合物,溶解后能产生很多正电荷,能中和红细胞表面带有的负电荷,降低红细胞Zeta电位,并缩短红细胞之间的距离,使红细胞产生非特异性凝集,这种凝集是可逆的。最后加入悬浮液,它具有中和凝聚***阳离子的作用,使正常的红细胞非特异性凝集散开,试验结果阴性;如果红细胞被相应的抗体致敏,则会被凝聚***凝结,凝集不会散开,试验结果为阳性。
盐水法操作程序:
1、取小试管2支,标明主、次侧。主侧:受血者血清2滴加供血者3~5%生理盐水红细胞悬液1滴;次侧:供血者血清2滴加受血者3~5%生理盐水红细胞悬液1滴。
2、混匀,以1000r/min,离心1min,取出,先目测上层液体是否溶血,再轻轻摇动试管,检查红细胞是否凝集。
3、结果判断:主、次两侧无凝集、无溶血,表示配血相合,可以输血;主、次侧有一侧凝集或溶血,表示配血不相合,不能输血。
缺点:
1、只能检测出完全抗体(抗-A、抗-B)引起的血型不合,对免疫性抗体引起的血型不合不能检出,有输血史或不明输血史及妊娠史不能用该法。
2、本实验中的生理盐水对血清(浆)中的抗体有稀释作用,易导致配血结果假阴性。
3、易受冷凝集素的干扰。
聚凝***配血法
1、在盐水配血法操作完后,主、次侧加入低离子强度溶液(LISS),混匀,置室温1min。
2、主、次两侧加聚凝***2d,混匀,置室温15s,3400r/min,离心10s,,轻摇试管,目测红细胞是否凝集,如不凝集必须重做。如果凝集,再加重悬液2滴,轻摇试管,仔细观察有无凝集,如有怀疑应在显微镜下观察结果。