文档介绍：窗体顶部
中华人民共和国国家标准
GB 15670-1995
农药登记毒理学试验方法
Toxicological test methods of
Pesticides for registration
1 主题内容与适用范围
本标准规定了农药登记毒理学试验的方法、条件的基本要求。
本标准适用于为农药登记而进行的毒理学试验。
2 急性经口毒性试验
目的
求出试验农药对试验动物的半数致死剂量(LD50);通过观察急性毒性效应的临床表现,初步估测毒作用的靶器官和可能的毒作用机理;为亚慢性、慢性和其他毒性试验的剂量水平设计提供参考;为急性毒性分级和制定安全防护措施提供依据。
试验农药
原药和制剂。
试验动物
主要选用品系、遗传背景明确的初年大鼠。各剂量组内同性别动物体重差异应小于平均体重的10%,组间同性别动物体重均值差异应小于5%。
每一剂量组的大鼠8~10只(雌雄各半),试验前要对动物观察一周,确认健康后,方可使用。
剂量分组
至少应设4~5个剂量组,各剂量组之间要有适当的剂量间距。以便各组出现不同程度的毒性效应(死亡率),求得剂量效应曲线及LD50。
如剂量达5000mg/kg体重以上,动物仍不出现死亡,则不需要进行更高剂量的试验。
给药方法及观察时间
动物给药前应隔夜禁食但不禁水,称重后,一次灌胃给药,给药后至少间隔2h进食。
灌胃量
大鼠按100g体重给1mL,,灌胃可用水溶液、油溶液或悬液。
给药后立即观察并记录动物的中毒表现,症状出现和消失的时间及死亡时间。给药当日应连续观察,其后,每日至少观察2次,观察期为14d。如在给药96h后出现迟发性新效应,则应延长观察期至3周或4周。
观察指标
中毒症状
全面观察中毒的发生、发展过程和规律以及中毒特点和毒作用的靶器官。观察的系统包括:
:体位异常、叫声异常、不安、呆滞、痉挛、抽搐麻痹、运动失调、对外反应过敏或迟钝;
:瞳孔扩大或缩小、流涎或流泪;
:鼻孔流液、鼻翼煽动、呼吸深缓、呼吸过速、蜂腰;
:会阴部污秽、有分泌物、阴道或乳房肿胀;
:皮肤充血、紫绀、被毛蓬松、污秽;
:眼球突出、结膜充血、角膜混浊;
:腹泄、厌食。
体重
给药前、死亡时各称量一次体重,观察期间每3d称量一次。
一般不做病理组织学检查和生化指标检验,但对死亡动物应做大体病理学观察。如24h以上的存活动物,肉眼检查有病变时应做病理组织学检查。
结果评定
用统计方法计算LD50值。计算方法见附录A(补充件)。
按农药的急性经口毒性分级标准进行评定(见表1)。
表1 急性经口毒性分级标准
级别
经口LD50,mg/kg
剧毒
高毒
中毒
低毒
<5
5-50
50-500
>500
3 急性经皮毒性试验
目的
了解农药对试验动物皮肤直接接触引起局部皮肤损伤、全身中毒的特征等毒性效应,求出半数致死剂量(LD50),为制定农药生产和应用中的防护措施提供依据。
试验农药
原药和制剂。
试验动物
为有足够的涂药面积,首选成年大鼠,体重要求200-300g。
各剂量组大鼠8~10只(雌雄各半)。
剂量分组
至少应设4个剂量组,各剂量组应有一定的间距,使给药组能出现毒性表现和死亡。
如果2000mg/kg剂量仍不出现死亡时,则不需要再进行高剂量试验。
给药方法及观察时间
给药前24h背部去毛,注意勿损伤皮肤,涂药面积应占体表面积10%,大鼠4×5cm^2,兔12×14cm^2,豚鼠7×10cm^2。
液体农药用原药液,粉末农药用水或溶剂稀释。
先将动物固定,在略小于剃毛面积内进行定量敷药,然后覆盖一个与脱毛面积相当的盒式罩,再用胶布固定。以防止动物舔食试验药品。
涂药持续时间为4h。
3
. 涂药4h后取下罩盒,用温水洗去皮肤上的试验农药,再进行局部观察。
观察时间为2周。
观察指标
中毒的临床表现,。
死亡时间及死亡率。
结果评定
用统计方法计算LD50值。计算方法见附录A(补充件)。
按农药的急性经皮毒性分级标准