基因工程及其应用.ppt

文档介绍：基因工程及其应用
第2节
学****目标:

、医药等领域的应用

学****重点:
学****难点:




你知道为什么能把人的基因“嫁接”到细菌上吗?你能推测出,这种基因的“嫁接”是怎么实现的吗?你能举出一些类似的、与你的生活关系很密切的例子吗?
问题探讨
“嫁接”了人胰岛素基因的工程菌
一、基因工程的概念:
又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
基因重组
生物体外
基因/DNA
分子水平
剪切→拼接→导入→表达
人类需要的基因产物
培育转基因大肠杆菌的简要过程:
你认为上述培育转基因大肠杆菌的关键步骤有哪些?
普通大肠杆菌
(不能分泌胰岛素)
人体组织细胞
提取
胰岛素基因
与运载体DNA拼接
导入
大肠杆菌(含胰岛素基因)
转基因大肠杆菌
(能分泌胰岛素)
实例展示
培育转基因大肠杆菌的关键步骤:

胰岛素基因从人体细胞内提取出来

胰岛素基因与运载体DNA连接

胰岛素基因导入受体(大肠杆菌)细胞
基因的“剪刀”
基因的“针线”
基因的运载体
二、基因操作的工具
1、基因的“剪刀”——限制性内切酶(限制酶)
例如:大肠杆菌()的一种叫EcoRⅠ的限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间将这段序列切开。
①分布:主要在微生物中。目前已发现的限制酶有200多种。
②特点:专一性。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。
限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成,如 EcoRⅠ、SmaⅠ,也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成。
磷酸二酯键
什么叫黏性末端?
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时,产生的是黏性末端。从中心轴线切开时,产生的是平末端。
G
C T T A A
G
A A T T C
被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?
思考:
黏性末端
黏性末端