文档介绍：实验一ABO正反定型及Rh定型、唾液血型物质检测
注意事项
、儿童
作业
简述ABO血型鉴定正反不一致的原因
4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。
实验一ABO正反定型及Rh定型、唾液血型物质检测
注意事项
、儿童
作业
简述ABO血型鉴定正反不一致的原因
4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。
3+ 红细胞凝集成大小块，血清清晰。
2+ 红细胞凝块分散成许多小块，血清清晰。
l+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。
± 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞。
mf 混合凝集外观（mixed field）指镜下可见少数红细胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。
－ 表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。
红细胞凝集强度判断标准
目的 掌握Rh血型鉴定的原理、方法。
原理 Rh血型系统，包括四十几个抗原，通常使用相应的抗C、抗c、抗D、抗E、抗e五种Rh分型血清来检查红细胞抗原。
在临床输血中一般只做D抗原的鉴定，被检红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集者为Rh阴性。
二 、 Rh血型鉴定
器材 小试管、滴管、试管架、记号笔、载玻片、显微镜、离心机。
试剂
：常用的为IgM抗D。
％红细胞悬液各1份
。
标本 静脉血。
操作(盐水试管测试法)
-D（IgM）-C、-c、-E、-e试剂各1滴到5支试管中。
％～5％待检红细胞悬液。
，以1000 g离心15秒。
：轻摇散开试管底部的细胞扣，用肉眼观看凝集。
注意事项
1．如临床上只检查是否为Rh阳性，只需用抗D血清进行鉴别，如结果为阴性，应进一步检查排除Du型。
2．因抗e血清难以得到，故临床上常用四种Rh抗血清来定型。
3．Rh血型鉴定应严格控制温度与时间，因Rh抗原、抗体凝集反应块比较脆弱，观察反应结果时，应轻轻摇动试管，不可用力振摇。
4．如鉴定结果只与抗D血清起反应，而与抗C、-c、-E、-e都不凝集，则受检者为Rh缺失型，以-D-表示。
唾液中HAB血型物质测定
【目的】
了解唾液HAB血型物质测定的原理、方法。
【原理】
HAB血型物质也存在于某些人的分泌液中。唾液中HAB血型物质为半抗原，能特异性地与相应抗体结合，从而抑制抗体与相应红细胞发生凝集。所以利用凝集抑制试验，可测定唾液中HAB血型物质，它有助于ABO亚型的分类及其特殊情况下血型的鉴定
【器材】
小试管、滴管、试管架、记号笔、离心机
【试剂】
1. ５％A、B和O型红细胞盐水悬液。
2. 最适稀释度抗血清的制备（标化血清）
【标本】受检者唾液
，将留取的唾液1000g离心，取上清液置于大试管中，煮沸10min，再离心10min，留取上清液备用。
，分别标明-A、-B、-H，3管各加唾液1滴，每管加相应标化血清1滴。
，置室温，中和10min。
.
5. 混匀，离心15秒，观察结果.
标化血清
：3排18支，分别抗A、抗B及抗H。每排再标2、4、8、16……
：每管加盐水50μl。每排第1管对应加抗A抗B及抗H血清50μl，倍量稀释成2、4、8、16……稀释液。
％悬红：每排各管对应加悬红50μl，振摇混匀，1000g，离心15秒。
：以３+为标化血清的最适稀释度。
操作步骤
反应物
抗Ａ管
抗Ｂ管
抗Ｈ管
受检唾液
１d
１d
１d
标化抗Ａ
１d
标化抗Ｂ
１d
标化抗Ｈ
１d
混匀，室温中和10min
３%Ａ红细胞
１d
３%Ｂ红细胞
１d
３%Ｏ红细胞
１d
混匀室温放置10min，离心后观察
抗A管
抗B管
抗H管
非分泌型
4+
4+
4+
A型分泌型
—
4+
1— 4+
B型分泌型
4+
—
1— 4+
0型分泌型
4+
4+
—
AB型分泌型
—
—
1— 3+
结果判定
，各加分泌型和非分泌型唾液l滴．再加抗H最适稀释度血清l 滴，以3％0型红细胞作指示，同时进行试验，阳性对照应不凝集，阴性对照应凝集。
【注意事项】
1．如果加热前不离心并除去沉淀，任何可能存在的细胞可释放H物质