文档介绍：实验二毛细血管采血、微量吸管、牛鲍计数板的使用及显微镜法红细胞计数
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6、注意事项
（1）操作步骤3需反复练****才能准确吸取血液到所需量。
（2）一次吸取血液到所需的量，吸管内不片上有四个槽构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大方格，中央的一大方格作为计数用，称为计数区。计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个中方格（大方格用三线隔开），而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个中方格（中方格之间用双线分开），而每个中方格又分成16个小方格。但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。计数区边长为1mm，则计数区的面积为lmm2，每个小方格的面积为1/400mm2。盖上盖玻片后，，，每个小方格的体积为1/4000mm3。
四、显微镜法红细胞计数
原理
用等渗稀释液将血液稀释一定的倍数后，滴入计数板，在显微镜下计数一定范围内红细胞数，经换算可求得每升血液中的红细胞数。
红细胞稀释液
Hayem液（赫姆氏红细胞稀释液）
枸橼酸钠稀释液
普通生理盐水或加1%甲醛的生理盐水
①Hayem液
主要成分及作用：
NaCl 调节渗透压；
Na2SO4 调节渗透压，提高比重防止细胞粘连；
HgCl2 防腐；
缺点：遇高球蛋白血症患者，由于蛋白质沉淀而使红细胞易凝集。
②枸橼酸钠稀释液
主要成分及作用：
NaCl 调节渗透压；
枸橼酸钠调节渗透压，抗凝；
甲醛防腐；
优点：配制简单，可使红细胞在稀释后较长时间保持正常形态并且不凝集，故应用较广。
③普通生理盐水或加1%甲醛的生理盐水
急时用。
【操作方法】
l、，放入一小试管内。
2、用微量吸管吸血至l0ul处。
3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内，吸上清液嗽洗吸管2-3次，立即摇匀。
4、用微量吸管或玻棒取混悬液少量，充入计数池内。
5、待2—3分钟，让红细胞完全下沉后，将计数板平放在显微镜台上，用低倍镜观察，如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。
红细胞计数的区域:
中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。
充液位置
充液位置
为红细胞计数区域
计数原则:
数上不数下，数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线)上的红细胞，只计上侧与左侧线上的细胞，而压在下侧与右侧线上者不计入。
压线细胞的计数原则：
数左不数右，数上不数下
【计算】
红细胞数/L=5个中方格内红细胞数×5×10×200×106 /L=5个中方格内红细胞数×1010 /L =5个中方格内RBC数/100×1012

式中:
×5: 5个中方格换算成1个大方格
×10: ，换算成 uL。
×200：血液的稀释倍数
×106 : 由1uI换算成1L
例：，加血10ul，
混匀。充液，静置2～3min，计数中央大
方格内四角和正中五个中方格内的红细
胞，共600个，请计算红细胞计数结果。
RBC/L＝600 / 5×25
×10
×200
×106
＝×1012
报告方式：
RBC: ×l012/L
七. 参考值
男性： (～)×1012／L
女性： (～)×1012／L
新生儿：(～)×1012／L
400～550 万/ul
350～500 万/ul
手工显微镜法红细胞计数
( RBC )
【注意事项】
1、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血，操作迅速避免血液凝固，如有血凝块应重新采血。
同时做血红蛋白测定，白细胞计数和分类计数，在采血时应先做血膜再做红细胞，然后做白细胞，血红蛋白检验，避免红细胞破坏。
2、充液：
充液前，红细胞复液要充分摇匀，红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀，不可有气泡，亦不可有多余液体外溢。
3、质量控制：
中方格内红