复件 无菌技术及无菌操作1.ppt

文档介绍：复件 无菌技术及无菌操作1
无菌技术
灭菌方法
细胞培养无菌操作基本技术
无菌技术
无菌技术是用于细胞培养过程的术语，其基本原理可用于所有的细胞类型。无菌技术有两个主要目的，一是防止实验室的培养物被其他来源的微生物（如
复件 无菌技术及无菌操作1
无菌技术
灭菌方法
细胞培养无菌操作基本技术
无菌技术
无菌技术是用于细胞培养过程的术语，其基本原理可用于所有的细胞类型。无菌技术有两个主要目的，一是防止实验室的培养物被其他来源的微生物（如皮肤、衣服或周围环境的微生物）污染。二是防止实验工作者（包括老师和学生）被微生物感染。
无菌试验
无菌实验室
无菌操作
细胞培养无菌操作
P2 级无菌操作台
无菌操作
无菌操作室
无菌操作室
灭菌方法
消毒：一般指消灭病原菌和有害微生物 的营养体。
灭菌：一般指杀灭一切微生物的芽孢孢子及休眠体。
灭菌的方法：
一、加热法 二、过滤除菌 三、辐射灭菌 四、化学药品灭菌
一、加热法
1、干热灭菌
方法：热空气灭菌和
灼烧。
机理：利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌目的。
2、湿热灭菌
方法：高压蒸汽灭菌法、常压蒸汽灭菌法、煮沸消毒法和超高温杀菌法。
机理：利用高温（高于100℃）导致菌体蛋白质变性达到目的。
干热灭菌箱
湿热灭菌分类
1 高压蒸汽灭菌法
2 常压蒸汽灭菌法（间歇灭菌） 可采用阿诺氏流动蒸汽灭菌器进行。
3 煮沸消毒法
4 超高温杀菌
(2)无菌操作工作区域应保持清洁与宽敞,必要物品,如试管架,移液器或吸管头等可以暂时放置,其它实验用品用完后应及时移出,%,勿在边缘非无菌区域操作。
(3)小心取出无菌实验用品,,,用手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放在台面上。
(4)工作人员应注意自身的安全,,并选择适当等级的无菌操作台(至少两级).操作过程中,应避免引起气溶胶的产生,小心有毒性试剂,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐物品伤人等。
(5)定期检查下列项目:CO2钢瓶内的CO2压力;CO2培养箱内的CO2浓度,温度,及水盘是否有污染;无菌操作台内气流压力是否正常,定期更换紫外灯管及HEPA过滤器滤膜,预滤网（300小时/预滤网,3000小时/HEPA)。
Thank you