文档介绍：实验五薄层色谱实验
一、实验目的
1、掌握薄层色谱的操作技术。
2、了解薄层色谱的基本原理和应用。
二、实验原理: 1、原理 薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用 TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。样品在薄层板上的吸附剂(固定相)和溶剂(移动相)之间进行分离。由于各种化合物的吸附能力各不相同,在展开剂上移时,它们进行不同程度的解吸,从而达到分离的目的。
2、薄层色谱的用途:
1)化合物的定性检验。(通过与已知标准物对比
的方法进行未知物的鉴定)在条件完全一致的情况,纯碎的化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距离,称比移值(Rf值),所以利用薄层色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。
影响比移值的因素很多,如薄层的厚度,吸附剂颗粒的大小,酸碱性,活性等级,外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以,要获得重现的比移值就比较困难。为此,在测定某一试样时,最好用已知样、品进行对照。
2、快速分离少量物质(几到几十微
克,µg)
3、跟踪反应进程在进行化学反应
时,常利用薄层色谱观察原料斑点
的逐步消失,来判断反应是否完成。
4、化合物纯度的检验(只出现一个斑
点,且无拖尾现象,为纯物质)
三、实验装置
薄层板
玻璃板
上涂吸附剂层
SiO2
Al2O3
上行法
薄层板
层析缸
展开剂
层析缸
展开剂
滤纸条
下行法
薄层板
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四、实验步骤:
1、吸附剂的选择
薄层色谱的吸附剂最常用的是氧化铝和硅胶。
1)硅胶:
“硅胶H”—不含粘合剂;
“硅胶G”—含煅石膏粘合剂;
其颗粒大小一般为260目以上。颗粒太大,展开剂
移动速度快,分离效果不好;反之,颗粒太小溶
剂移动太慢,斑点不集中,效果也不理想。
四、实验步骤:
对化合物的吸附能力与它们的极性成正比,具有较大极性的化合物吸附较强,因而Rf值较小。
酸和碱> 醇、胺、硫醇> 酯、醛、酮> 芳香族化合物> 卤代物、醚>烯> 饱和烃
本实验选择的吸附剂为薄层色谱用硅胶G。