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微柱凝胶免疫检测卡长春博迅.ppt

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微柱凝胶免疫检测卡长春博迅.ppt

上传人:核辐射 2022/7/30 文件大小:1.37 MB

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文档介绍

文档介绍:微柱凝胶免疫检测卡长春博迅
新生儿溶血病检测卡系列
新生儿溶血病(HDN)是发生在胎儿和新生儿的一种免疫溶血性疾病。
该病由母婴血型不合引起,轻者出现贫血、水肿、肝脾肿大,严重者造成
新生儿死亡或发生核黄疸且产生后遗症。准确的产旧血需设阴性对照)。
2、抗凝血样标本要上清澄清。如有纤毛状、浑浊、乳糜、溶血、脂肪等状,应
再次洗涤离心。为防止纤维蛋白影响红细胞沉降,建议使用红细胞稀释液。
3、血辫血样须放置试管中离心处理,确保血清澄清微黄。必要时需洗涤。
4、在18-25℃条件下平衡30分钟,防止冷凝集。
红细胞悬液的制备:
1、-%的悬液,最高浓度不要超过1%。如,取8微升压
积红细胞,加入到1毫升的红细胞稀释液中,%的红细胞悬
液。
2、外观检查呈均匀淡红色,无血块、无絮状物(如有纤维蛋白需去除)。
二、结果判定:
阳性结果:红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合
物浮在凝胶表面或胶中,为阳性反应。
阴性结果:红细胞抗原无相应的抗体结合,不出现特异性抗原抗体复合物,红细胞沉于微柱凝胶的尖底部,为阴性反应。
反应强度:特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面,为强阳性反应;复合物在胶中,为弱阳性反映;愈靠近胶底部颗粒愈小,反应愈弱。
4+ 红细胞复合物(凝集)位于凝胶表面
3+ 大部分红细胞复合物位于凝胶表面,少部分位于凝胶中部
2+ 大部分红细胞复合物位于凝胶中部,少部分位于凝胶中上部
1+ 红细胞复合物位于凝胶中下部
± 与同一卡中阴性管结果对照,如与阴性结果有差别,即为±
— 红细胞完全沉积在凝胶管尖底部
完全溶血 凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞,液体出现透明清澈红色
不完全溶血 残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部,液体出现透明清澈红色
混合凝集 红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
反应强度
现象及说明
4+  3+ 2+ + ± - H H M
完全 不完全 混合凝集
三、标准操作规程:
1、ABO、RhD血型定型试剂卡(单克隆抗体)
操作步骤:
1)将准备好的试剂卡做好标记;
2)-%红细胞悬液分别加入1-4管中,各50µl;
-%
红细胞悬液
50µl
50µl
50µl
50µl
3)将待检者血清分别加入5-6管中,各50µl;
4)-%的ABO血型反定型红细胞试剂悬液,分别加入5-6管中,各50µl;
50µl
50µl
50µl
50µl
待检者血清
A细胞
B细胞
5)离心5分钟(900rpm2分钟,1500rpm3分钟);
6)肉眼观察结果。
结果:A型RhD阳性
2、ABO、RhD血型定型试剂卡(单克隆抗体)—红细胞抗原检测
操作步骤:
1)将准备好的试剂卡做好标记;
2)-%红细胞悬液分别加入第1—3或4—6管中,各50µl;
-%
红细胞悬液
50µl
50µl
50µl
-%
红细胞悬液
50µl
50µl
50µl
3)离心5分钟(900rpm2分钟,1500rpm3分钟);
4)肉眼观察结果。
结果:;
3、ABO、RhD血型定型试剂卡(单克隆抗体)——Rh血型抗原检测
操作步骤:
1)将准备好的试剂卡做好标记;
2)-%红细胞悬液分别加入1—6管中,各50µl;
-%
红细胞悬液
50µl
50µl
50µ