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文档介绍

文档介绍:微生物突变类型
遗传变异类型
菌种退化变异的原因
遗传基因型的分离
自发变异的产生
用沙土管等长期保藏
菌种连续传代
活细胞内进行的新陈代谢
DNA中存在的增变基因、死亡基因等引起基因突变
诱变剂处理后的退化变异微生物突变类型
遗传变异类型
菌种退化变异的原因
遗传基因型的分离
自发变异的产生
用沙土管等长期保藏
菌种连续传代
活细胞内进行的新陈代谢
DNA中存在的增变基因、死亡基因等引起基因突变
诱变剂处理后的退化变异
初筛菌落不纯
诱变菌种是异核体细胞
诱变菌种的DNA发生缺失、整合和重排
自然分离
纯种筛选的选择性标记
排除低产型菌落
低产型菌落的特征
光秃型,不产气生菌丝。
生长势衰退,菌落长得过小。
菌落表面、孢子生长和颜色等不均匀。
生长过于旺盛。
高产型菌落的特征
孢子生长有减弱趋势。
菌落大小适中,有偏小趋势,但不是极小。
菌落偏小,但孢子生长丰满。
孢子颜色有减弱的趋势。
沟纹多、密、直而整齐。
营养菌丝分泌色素或逐渐加深,或逐渐变浅。
摇瓶筛选高产型菌株
遗传基因型纯度考察
传代稳定性试验
抗生素作为诱变剂用于菌种选育
b-内酰***抗生素:抑制细胞壁的合成
多烯类抗生素(制霉菌素、***霉素B):作用于细胞膜的Na+-K+-ATP酶、磷酸转移酶等,损伤含有麦角甾醇等的真菌细胞膜而造成细胞内含物向外泄漏。Eg 制霉菌素处理产黄青霉获得高产青霉素。
大环内酯和氨基环醇类抗生素:抑制mRNA聚合酶、氨酰tRNA合成酶、肽酰基转移酶和各种蛋白质因子的活性来抑制蛋白质合成,从而干扰生物体的正常复制
抗肿瘤抗生素:使微生物菌种的细胞壁、细胞质膜、核酸和蛋白质的生物合成系统发生变化而得到突变株。. 丝裂霉素C处理春日霉素产生菌获得高产突变株。
诱变处理过程中的几个有关问题
诱变剂
诱变剂的选择:各种诱变剂交替使用。
诱变剂量的选择:75~%致死率。
增变剂的选择:
***化锂 孢子萌发 增强uv的诱变效果。
8-甲氧基补骨脂素+长波紫外线,吸收其能量而与DNA分子中胸腺嘧啶结合。获得麦白霉素高产菌株。
补骨脂素与DNA中碱基的作用
影响诱变效果的因素
出发菌株的选择:纯、稳定
对菌种生理特性的要求:
新鲜培养的斜面孢子、预萌发的孢子
单孢子悬浮液
诱变处理时的外部条件:
UV:避光
NTG:不能用pH中性的buffer
碱基类似物:合成培养基添加碱基类似物
高单位菌种选育方法的进阶