文档介绍：华中科技大学
硕士学位论文
LY294002增强人胰腺癌PANC-1细胞对吉西他滨的敏感性
姓名:柯晓煜
申请学位级别:硕士
专业:内科学(消化系统)
指导教师:赵秋
20090501
华中科技大学硕士学位论文
LY294002 增强胰腺癌 PANC-1 细胞对吉西他滨的敏感性
华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科
研究生:柯晓煜
指导老师:赵秋教授
中文摘要
目的:LY294002 是一种广泛应用的 PI3K 抑制剂,可特异性抑制 PI3Kp110 亚单
位的催化活性,可能通过抑制 Akt 的磷酸化水平而逆转其耐药性。本实验通过研究
LY294002 联合吉西他滨对体外培养的人胰腺癌 PANC-1 细胞内 P-AKT、MRP 基因的
抑制作用,探讨 LY294002 增强胰腺癌 PANC-1 细胞对吉西他滨的敏感性。
方法:采用免疫组织化学 SP 法检测胰腺癌组织、慢性胰腺炎组织和正常胰腺组
织中 PI3K、P-AKT 和 MRP 三种蛋白的表达。半定量 RT-PCR 和 Western blot 检测不
同浓度的 LY294002 联合吉西他滨用药后 PANC-1 细胞内 P-AKT、MRP mRNA 和蛋
白表达水平的变化。
结果:PI3K、P-AKT 和 MRP 三者在胰腺癌中的表达均明显高于其在正常胰腺和
慢性胰腺炎组织中的表达(分别为 P< 和 P<),而且 PI3K、P-AKT 的异常表
达与胰腺癌的淋巴结转移和 TNM 分期相关(P<)。MRP 与 PI3K、P-Akt 蛋白的
表达之间均呈正相关,PI3K 与 P-Akt 蛋白的表达也呈显著正相关。LY294002 联合吉
西他滨用药后 PANC-1 细胞内 P-AKT、MRP mRNA 的表达水平呈明显下降趋势,实
验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<);LY294002 联合吉西他滨能明显
的抑制 PANC-1 细胞内 P-AKT、MRP 蛋白的表达,并且这种抑制作用与药物浓度显
著相关(P<),在其浓度最大组抑制效应达到最大。
结论:LY294002 能明显增强胰腺癌 PANC-1 细胞对吉西他滨化疗药的敏感性,
而且 LY294002 可能通过下调 PANC-1 细胞 P-AKT mRNA 和蛋白的表达,进而抑制
MRP mRNA 和蛋白的表达,从而逆转肿瘤的耐药。
关键词:LY294002;吉西他滨;PANC-1 细胞;P-AKT;MRP
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华中科技大学硕士学位论文
LY294002 Strengthens Sensitivity of Human Pancreatic
Carcinoma PANC-1 Cells to Gemcitabine
Department of Gastroenterology, Tongji Hospital, Tongji Medical College,
Huazhong University of Science and Technology
Postgraduate: Xiaoyu Ke
Tutor: Professor Zhao Qiu
ABSTRACT
Backround & Aim: LY294002 is widely applied as an inhibitor of PI3K, which
could specificly inhibit catalytic activity of p110 subunit of PI3K. And LY294002 may
reverse resistance of pancreatic carcinoma cells to gemcitabine by inhibit acidification
level of Akt. Therefore, we investigate the effects of LY294002, the inhibitor of PI3K,
combined with Gemcitabin on the drug resistance of human pancreatic carcinoma PANC-1
cells, and probe LY294002 strengthen sensitivity of human pancreatic carcinoma PANC-1
cells to gemcitabine.
METHODS: SP immunohistochemical