文档介绍：华中科技大学
硕士学位论文
补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠胰岛素信号
转导的影响
姓名:谢阳
申请学位级别:硕士
专业:中西医结合临床
指导教师:陆付耳
20090501
华中科技大学硕士学位论文
中文摘要
第一部分补肾通脉方对伴有胰岛素抵抗的多囊卵巢综合
征大鼠胰岛素抵抗及排卵障碍的影响
目的皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)联合高脂高卡饮食喂养,建立一种新的胰岛素
抵抗(insulin resistance, IR)的多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome, PCOS)
大鼠模型。并观察补肾通脉方对 PCOS 大鼠的影响。
方法 23日龄雌性 SD 大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠 9mg·100g-1·d-1 共 20 天,联合高
脂高热卡饮食喂养 80 天建立伴 IR 的 PCOS 大鼠模型。成模大鼠随机分为模型组和中
药组,另设 13 只正常组。中药组大鼠以补肾通脉方干预。HE 染色观察各组大鼠卵巢
形态学变化,葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FBG),放射免疫法测定血清空腹胰岛
素(Fins)、睾酮(T)、雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH),计算
胰岛素敏感指数(ISI)和 LH/FSH。
结果与正常组比较,模型组大鼠卵巢呈多囊样改变,平均排卵数及排卵率、ISI、FSH
明显降低(P<,P<),FBG、Fins 和 T、E2、LH、LH/FSH 浓度显著升高(P
<,P<)。与模型组比较,中药组大鼠卵巢卵泡内颗粒细胞层数明显增加,
平均排卵数及排卵率、ISI、FSH 均明显增加(P<),Fins、T 和 E2、LH/FSH 显
著降低(P<)。
结论皮下注射 DHEA 联合高脂高卡饮食,可成功诱导 IR 的 PCOS 大鼠模型。补肾
通脉方可改善 PCOS 大鼠的胰岛素抵抗及排卵障碍。
关键词多囊卵巢综合征;胰岛素抵抗;动物模型;补肾通脉方
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第二部分补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠
胰岛素受体表达的影响
目的观察补肾通脉方对伴IR的PCOS大鼠胰岛素靶器官中胰岛素受体(insulin
receptor, InsR)表达的影响,探讨补肾通脉方改善伴IR的PCOS的机制。
方法 23日龄雌性SD大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠9mg·100g-1·d-1共20天,联合高脂饮
食喂养80天建立伴IR的PCOS大鼠模型。成模大鼠随机分为模型组和中药组,另设13
只正常组。中药组大鼠以补肾通脉方干预。各组大鼠于动情后期,在门静脉推注胰岛
素前后各处死一半。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组大鼠肝脏、脂肪、
骨骼肌组织InsR mRNA表达,免疫组化检测卵巢组织InsR蛋白表达。
结果模型组InsR在肝脏、骨骼肌和脂肪组织中mRNA及卵巢中蛋白表达,均明显低
于正常组(P<),中药组均显著高于模型组(P<)。胰岛素刺激后,各组肝脏、
脂肪、骨骼肌组织中InsR mRNA及卵巢中蛋白表达,均较刺激前明显增多(P<)。
结论补肾通脉方可改善伴IR的PCOS,其机制可能与提高胰岛素靶组织InsR的表达,
改善胰岛素信号转导等环节有关。
关键词多囊卵巢综合征;胰岛素抵抗;补肾通脉方;胰岛素受体
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第三部分补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠
胰岛素受体底物-1 表达的影响
目的观察补肾通脉方对伴 IR 的 PCOS 大鼠胰岛素靶器官中胰岛素受体底物-1
(insulin receptor substrate-1, IRS-1)表达的影响,探讨补肾通脉方改善伴 IR 的 PCOS
的机制。
方法 23日龄雌性 SD 大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠 9mg·100g-1·d-1 共 20 天,联合高
脂饮食喂养 80 天建立伴 IR 的 PCOS 大鼠模型。成模大鼠随机分为模型组和中药组,
另设 13 只正常组。中药组大鼠以补肾通脉方干预。各组大鼠于动情后期,在门静脉
推注胰岛素前后各处死一半。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组大鼠肝脏、
脂肪、骨骼肌 IRS-1 mRNA 表达,免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肝脏、脂
肪中 IRS-1 蛋白表达,免疫组化检测卵巢 IRS-1 蛋白表达。
结果模型组 IRS-1 在肝脏、脂肪、骨骼肌中 mRNA、蛋白表达,及卵巢中蛋白表达,
均明显低于