文档介绍：总糖和还原糖的测定
一、目的要求
掌握碱性铜试剂法测定还原糖的原理和操作方法。
二、原理
单糖和某些寡糖含有游离的醛基或***基,有还原性,属于还原糖;而多糖和蔗糖等属于非还原性糖。利用多糖能被酸水解为单糖的性质可以通过测定水解后的单糖含量对总糖进行测定。
还原糖的测定方法多种,本实验采用间接滴定法。其原理是:在碱性溶液中,二价铜离子被还原糖还原成一价的氧化亚铜,氧化亚铜在酸性环境中与一定量的过量碘起反应, 再用标准硫代硫酸钠滴定剩余的碘,即可算出还原糖的含量。反应方程式是:
2NaOH + CuSO4=Cu(OH)2↓+ Na2SO4
COOK COOK
Cu(OH)2 + H―C―OH = H―C―O
H―C―OH H―C―O
COONa COONa
Cu + 2 H2O
COOK
H― C ―O
H―C ―O
COONa
Cu
CHO
(CHOH)4+ 2 H2O = 2
CH2OH
COOK
H― C ―OH
H―C―OH
COONa
COOH
( CHOH)4
+ Cu2O↓
CH2OH
+
+
2
酒石酸甲钠
可溶性的氧化铜络合物
葡萄糖
酒石酸甲钠
葡萄糖酸
IO3¯ + 5 I¯ + 6 H 3 I2 + 3 H2O
+
Cu2O + I2 + H Cu + I ¯+ H2 O
+
2+
I2 + 2 S2O3 S4O6 + 2 I¯
2-
2-
因此,用硫代硫酸钠滴定剩余的碘,在有已知浓度的标准还原糖浓度时,可以间接地计算出未知样品的还原糖的含量。
三、试剂与器材
1. 试剂铜试剂、 mol/L硫代硫酸钠溶液、2%碘化钾溶液、
mg/mL标准葡萄糖溶液、1%淀粉指示剂
2. 器材
碱式滴定管、恒温水浴锅
四、操作步骤
取6只试管,按照下表的次序加入试剂。另取6个小三角烧瓶,按相应的试管顺序编号。
试剂
管号
H2O
(mL)
标准葡萄糖
(mL)
还原糖提取液
(mL)
总糖水解液
(mL)
铜试剂
(mL)
沸
水
浴
中
煮
沸 15 分
钟
空白
试验
1
2
4
2
2
4
标准
试验
1