文档介绍：紫外可见分光光度法
（三）吸收光谱与发射光谱
1、吸收光谱：
物质由基态跃迁至激发态时，对辐射能选择性吸收而得到的原子或分子光谱。
(1)紫外分光光度法(UV):λ∈(200~400nm),用于有机物定性、定量、 一个特征常数。
（2）在温度和波长等条件一定时，ε仅与物质本身的性质有关，与待测物浓度c和液层厚度L无关；
（3）定性和定量分析依据：同一物质在不同波长时ε值不同。
不同物质在同一波长时ε值不同。
εmax表明了该物质在最大吸收波长λmax处的最大吸光能力。
4、吸光系数的意义:
2、百分吸光系数 / 比吸光系数 ：
3、两者关系:
例：P158~159
A=k c L
k = A /c L
一定λ下,c=1%(W/V)，L=1cm时的吸光度。单位：100ml/
1g/100ml
Date
1．定义：以A为纵坐标， λ为横坐标，绘制的λ~A曲线。
四、吸收光谱（吸收曲线）
2．吸收光谱术语：
①吸收峰→λmax ,②吸收谷→λmin
③肩峰→λsh , ④末端吸收
⑤强带： max>104，弱带： max<103
特征值
Date
吸收光谱 特征值： λmax λmin λsh
●同一物质的吸收光谱特征值相同, (每一波长处吸光系数相同)。
同一物质相同浓度的吸收曲线重合。
●同一物质不同浓度，其吸收曲线形状相似,λmax相同。（定量）
●不同物质相同浓度，其吸收曲线形状,λmax不同。（定性）
定性、定量分析：
在吸收曲线λmax 处测吸光度A。
Date
五、偏离光的吸收定律原因
朗伯-比尔定律：A=k C L
依据Beer定律，A与C关系应为经过原点的直线
（一）化学因素
（二）光学因素
偏离Beer定律的主要因素表现为以下两个方面：
Date
该定律适用于稀溶液，溶质的离解、缔合、互变异构及化学变化也会引起偏离。
尤其浓度过高(>)会使C与A关系偏离定律：
①粒子相互作用加强，吸光能力改变。
②溶液对光的折射率显著改变。
（二）光学因素
1．非单色光的影响：入射光为单色光是应用该定律的重要前提：
2．杂散光的影响：仪器本身缺陷；光学元件污染造成。
3．反射和散色光的影响：散射和反射使T↓，A↑，吸收光谱变形。 通常可用空白对比校正消除。
4．非平行光的影响：使光程↑，A↑，吸收光谱变形。
（一）化学因素
朗—比耳定律假定所有的吸光质点之间不发生相互作用；
Date
第三节 紫外-可见分光光度计
依据朗伯-比尔定律，测定待测液吸光度A的仪器。（选择不同波长单色光λ、浓度）
光源
单色器
吸收池
检测器
信号处理及显示
分光光度计外观
分光光度原理图:
Date
一、主要部件
：
：包括狭缝、准直镜、色散元件
钨灯或卤钨灯
氢灯或氘灯
—可见光源 350~1000nm
—紫外光源 200~360nm
色散元件
棱镜
光栅
对不同波长的光折射率不同
衍射和干涉,不同波长的投射方向不同
玻璃棱镜:适用于可见区
石英棱镜:适用于紫外区
高度抛光的玻璃上刻有等宽、等距平行条痕
狭缝：进出光狭缝。
准直镜：复合光→平行光→色散后→聚集狭缝
最佳宽度:减小狭缝宽度而溶液吸光度不变。
：比色皿、比色杯，装样品溶液。有玻璃、石英杯两种
：光→电，光电池(硒,硅)，光电管(红,紫)，光电倍增管。
：放大较弱的电信号，并在检流计上显示出来。
Date
二、光学性能
：
：一般误差为±
—可见光 400~1000nm
—紫外-可见光 190~360nm
：波长准确度的1/2左右。
：单色光纯度指标。~
5. 分辨率：数值越小越好。中等仪器≤,高级仪器≤
：所含杂散光强度百分比作指标。中等仪器≤%, 高级仪器≤%
：中档仪器为0%~150%
：中档仪器为-~+
：中档仪器误差为 ±%
：测光准确度误差