文档介绍：沙门氏菌的检验
食品学院 14食品质量与安全1班
刘文敏柳基炜卫杰恒温紫君
201430520115 201430520116 201430520121 201430520122
摘要:本实验采用GB/-2010的检测方法测定鸡场中的沙门氏菌。通过本实验学****沙门氏菌的检测方法和技术,了解沙门氏菌的一些生化特性;本实验先用显色培养基找出可疑菌落,再做生化试验找出可疑的典型性的沙门氏菌,再通过血清学试验最终确定是否为沙门氏菌属。
关键词:沙门氏菌接种生化试验血清学鉴定
前言
沙门氏菌病是公共卫生学中具有重要意义的人畜共患病种之一,其病原沙门氏菌属于肠道细菌科。沙门氏菌是一个统称,泛指 2000 多种有紧密连系的细菌,包括引起食物中毒,导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。虽然只有少数人因沙门氏菌而患病,但是,在世界范围内的细菌性食物中毒事件中,由沙门氏菌引起的占大多数。因此,采用科学、合理的方法检验食品中沙门氏菌,已经成为了人们最关心的问题之一[1]。国标法(-2010)是目前中国规定的食品中沙门氏菌的标准检测方法,也是基层实验室普遍采用的检测方法,它根据沙门氏菌的生长特点和生化特性,采取前增菌、增菌、分离、生化试验和血清学鉴定5个步骤进行[2]。
材料与方法
均质器、三角烧瓶、平皿、玻璃棒、接种棒
恒温培养箱:36℃±1℃,42℃±1℃
吸管:1 mL(具 mL刻度)、10mL(
电子天平PL602-S,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;
手提式不锈钢压力蒸汽灭菌锅SYQ-DSX-280B,上海申安医疗器械厂
鸡肠、靛基质试剂、沙门氏菌O和H诊断血清、API20E生化试剂盒或VITEKGNI生化鉴定卡
蛋白胨水(BPW)、四硫磺酸钠煌绿(TTB)、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液、亚硫酸铋(BS)琼脂、HE琼脂、三糖铁琼脂、蛋白胨水、尿素琼脂、***化钾、***化钾对照、赖氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶对照、甘露醇、山梨醇、β-D半乳糖苷(ONPG)培养基
实验方法
蛋白胨水(BPW):称取蛋白胨10g、***化钠5g、磷酸氢二钠9g、、蒸馏水1000ml,将各成分加入蒸馏水中,搅混均匀,静置约 10 min,煮沸溶解,调节 pH,高压灭菌 121 ℃,15 min。分装10瓶,每瓶90ml
四硫磺酸钠煌绿(TTB):高压灭菌 121 ℃,15 min灭菌冷却后至30℃,每100ml基础培养液加碘液2ml,煌绿液1ml
(1)按照说明书上的用量进行换算,称取准确分量的合成培养基粉末;
(2)加热煮沸溶解培养基时,留意锅内水位的变化,水位下降可再添加适量的水,以免水分蒸发过多,导致后面分装不够量;
(3)往试管中放小导管时,注意处理气泡。
沙门氏菌群检测
沙门氏菌检测操作步骤
称取 10 g(mL)样品放入盛有 90 mL BPW的无菌均质杯中,以 8 000 r/min~10 000 r/m